Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

Culture in vitro, Les Techniques de culture in vitro - Coggle Diagram

- - - - est le processus par lequel une cellule méristématique (CaD cellule non differencier )se spécialise pour assurer une fonction précise (ex : cellule de racine ou de feuille).
        C’est le processus par lequel une cellule devient spécialisée pour faire une fonction précise.
        Exemple :
        Tu prends un cal (amas de cellules) dans un milieu de culture :
        si tu ajoutes certaines hormones → il va former des racines ou des feuilles .
        Donc la cellule se transforme en organe spécialisé = différenciation
    - - Une cellule spécialisée perd sa spécialisation et redevient une cellule “simple”.
        Exemple:
        Une cellule de feuille ou de racine devient:un cal (amas de cellules non spécialisées).
        Tu prends un morceau de feuille et tu le mets en culture :
        avec certaines hormones (ex : auxine élevée)
        ➡️ les cellules de la feuille perdent leur fonction
        ➡️ elles deviennent un cal
        ➡️ Donc cellule spécialisée → cellule non spécialisée = dédifférenciation
- - - - 2-Microbouturage
        
        -C’est une méthode de micropropagation.
        -On utilise de petits morceaux de plante (tige ou bourgeon).
        Résultat :
        ➡️ formation directe d’une nouvelle plantule complète
        Exemple:
        Un petit morceau de tige → donne une plante entière (racine + feuilles)
        
        Etapes
        
        ● Choix de l’explant : Sélection d’un fragment de plante contenant un bourgeon axillaire ou un nœud.
        
        ● Multiplication par prolifération de pousses : Induction de plusieurs nouvelles pousses grâce aux cytokinines dans le milieu de culture (ces hormones font pousser plusieurs nouvelles pousses à partir du bourgeon initial).
        
        ● Sous-cultures successives : Division et repiquage régulier des pousses pour augmenter leur nombre.
        
        ● Phase d’enracinement : Induction des racines sur les pousses obtenues par l’ajout d’auxines (pour developper les racines dans le milieu.
        
        ● Acclimatation progressive : adaptation progressive au milieu naturel.
      - 3-Microtubérisation
        
        permet de produire en laboratoire des microtubercules de pomme de terre à partir de fragments de tiges ou de nœuds, sur un milieu nutritif, pour obtenir un matériel végétal sain et homogène.
        
        Etapes
        
        ● Préparation des explants : Désinfection des segments nodaux ou bourgeons apicaux
        
        ● Multiplication des tiges : Culture sur milieu enrichi en BAP (une cytokinine qui stimule la formation de nouvelles pousses) et NAA (une auxine qui favorise l’allongement des cellules et la multiplication des pousses)
        
        ● Pré-tubérisation : Transfert des pousses sur un milieu liquide contenant GA3 (Acide Gibbérellique, une hormone stimulant la croissance des tiges et préparant au stress osmotique)
        
        ● Induction des microtubercules : Incubation des pousses dans un milieu riche en saccharose et dans l’obscurité pendant 60 jours pour favoriser la tubérisation par stress osmotique.
        
        ● Récolte et stockage : Récolte et désinfection des microtubercules puis stockage à 4 °C pour préserver leur viabilité
- - - - ● Sélection et coupe : choisir une plante saine et prélever la partie supérieure.
        ● Préparation du bourgeon : enlever les vieilles feuilles et exposer le bourgeon apical.
        ● Excision et ensemencement : prélever le bourgeon apical et le cultiver sur un milieu stérile.
        ● Développement : croissance de la plantule en conditions contrôlées.
        ● Transfert : mise en sol pour obtenir une plante adulte.
- - - - Étape 1 :Obtenir des haploïdes :
        Les plantes normales sont diploïdes (2 jeux chromosomes), mais on peut créer des plantes avec 1 seul jeu de chromosomes (haploïdes) grâce à :
        ● Androgenèse → à partir des cellules mâles (pollen).
        ● Gynogenèse → à partir des cellules femelles (ovules).
        Étape 2 : Haplodiploïdisation :
        ● Les haploïdes ont un jeu de chromosomes, donc ils ne peuvent pas se reproduire normalement.
        ● On fait un doublement artificiel de leurs chromosomes (on stoppe la mitose par la colchicine) → on obtient des plantes diploïdes (suite à une multiplication sans séparation des chromosomes).
        ● Ces plantes sont appelées haploïdes doublés (DH) et sont génétiquement homogènes.