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Technique histologique et cytologique - Coggle Diagram
Technique histologique et cytologique
Microscopie
Photonique
Ordre de grandeur de l'échantillon
Micron
Observation
Structure cellulaire d'un tissu (noyau, cytoplasme)
Mode de fonctionnement
Photon
MET
Ordre de grandeur de l'échantillon
Nanomètre
Observation
Tous les organites en gris (pas de couleur) = ultrastructure de la cellule
Mode de fonctionnement
Bombardement d'électron qui traverse l'échantillon
MEB
Ordre de grandeur de l'échantillon
Nanomètre
Observation
Surface de l'ultrastructure de la cellule
Mode de fonctionnement
Bombardement d'électron réfléchis
Préparation des échantillons avant l'étape microscopique
5 étapes
Prélèvement
Solide
Que des études histologiques
Liquide
Etudes chimique et/ou cytologiques
Autres
Etude cytologique
Frottis
Brossage
Fixation
Inclusion
Dans une résine
Seulement pour MET et photonique
Coupe
Coloration
Techniques de préparations cytologiques
Prélèvement
Etalement
Empreinte
Centrifugation
Cytocentrifugation
Fixation
Rôles
Conservation constituants cellulaire/tissulaire
Prévient l'autolyse cellulaire
Immobilise molécules in situ et protéine in vivo
Evite la macération
Les colorations
Coloration manuelle
Coloration automatique
Exemples
Frottis sanguin et cellules cytocentrifugées
Coloration au MGG
Frottis vaginal et cervico-vaginal
Coloration au papanicolaou
Techniques de préparation histologiques pour biopsies
Fixation
Fixateurs
Formol
Ethanol
Préparation à la coupe
Déshydratation
Par l'éthanol
Bains successif d'éthanol en concentration croissante
Le tissu comporte à la fin 60% d'éthanol à 100°
Infiltration
Par le xylène
Bains successif de xylène pour enlever les graisses
Le tissu comporte à la fin 60 % de xylène
Imprégnation
Par la paraffine fondu
Bains successif de paraffine fondu
Le tissu comporte à la fin 60 % de paraffine fondue
Inclusion
Durcissement du prélèvement à température ambiante
Le tissu comporte à la fin 60% de paraffine solidifiée
La coupe
Par un microtome
Faire des coupes de 3 à 5 microns
Montage et collage des coupes
Collage puis séchage des coups à l'étuve et/ou sur une platine chauffante
Colorations
Déparaffinage
Rinçage à l'éthanol
Rinçage dans l'eau
Exemples de colorations
Colorations topographiques de routine
Permet de voir différentes couches des tissus
Coloration trichrome
Colorant nucléaire
Hématoxyline
Violet
Colorant cytoplasmique
Fuchsine, éosine, phloxine
Rose
Colorant du collagène
Vert lumière, bleu de méthylène, jaune safran
Coloration histochimiques
Permet de mettre en évidence la spécificité d'un tissu
Groupement sulfaté
Bleu alcian
Glucides + membrane basale
PAS
Violet
Coloration histo- enzymologique
Permet de mettre en évidence les réaction enzymatiques in situ
Coloration immuno-histoclinique
Permet de mettre en évidence des molécules membranaires ou intracytoplasmique
Autres coloration
Argentines
Fibres de réticuline
Argentine de Grimélius
Cellules endocrines
Fontana Masson
Mélanine
Orcéine
Fibres élastiques