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IMMUNOISTOCHIMICA - Coggle Diagram
IMMUNOISTOCHIMICA
INTRO
QUESTA METODICA CONSENTE PRINCIPALMENTE DI DISTINGUERE LE DIVERSE LINEE DI DIFFERENZIAZIONE NEOPLASTICA,
SOPRATTUTTO NEI CASI DI NEOPLASIE SCARSAMENTE DIFFERENZIATE, CON MORFOLOGIE ISTOLOGICHE NON SUFFICIENTI A STABILIRE UNA DIAGNOSI MORFOLOGICA ESATTA.
IL CAMPIONE, PRELEVATO TRAMITE BIOPSIA, VIENE OPPORTUNAMENTE FISSATO, DI SOLITO IN FORMALINA O PARAFORMALDEIDE,
X PRESERVARE A LUNGO LE PROPRIE CARATTERISTICHE STRUTTURALI, IN MODO DA PERMETTERE ANALISI ATTENDIBILI ANCHE A DISTANZA DI TEMPO.
L’IMMUNOISTOCHIMICA È UNA TECNICA ANALITICA AMPIAMENTE UTILIZZATA X ANALIZZARE I TESSUTI BIOLOGICI AL FINE DI VALUTARE LA PRESENZA E LA DISTRIBUZIONE DI SPECIFICHE MOLECOLE ESPRESSE DALLE CELLULE CHE LI COMPONGONO,
ATTRAVERSO L’IMPIEGO DI ANTICORPI SPECIFICI CHE SONO IN GRADO DI LEGARLI E DI OPPORTUNI SISTEMI DI RILEVAMENTO DI TALE LEGAME.
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SUCCESSIVAMENTE IL CAMPIONE ORMAI SOLIDIFICATO PUÒ ESSERE INCLUSO IN UN BLOCCO DI PARAFFINA O CONGELATO,
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FASI
LA PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PUÒ RICHIEDERE ULTERIORI PASSAGGI FONDAMENTALI, COME
LA DEPARAFFINAZIONE, CHE SERVE A ELIMINARE LA PARAFFINA DAL VETRINO, LA REIDRATAZIONE DEL CAMPIONE E,
PRIMA DI INTRODURRE L’ANTICORPO, TROVIAMO IL COSIDDETTO “RECUPERO ANTIGENICO” (ANTIGEN RETRIVAL), CHE SERVE A RIPRISTINARE LA CONFORMAZIONE ORIGINALE DELLA STRUTTURA DELL’ANTIGENE ALTERATA DAI FISSATIVI, CAPACI DI RENDERE L’ANTIGENE NON RICONOSCIBILE DA PARTE DEGLI ANTICORPI.
IN ALCUNI CASI I CAMPIONI POSSONO ESSERE TRATTATI CON PARTICOLARI SOLUZIONI X EVITARE CHE L’ANTICORPO SI LEGHI A SITI NON SPECIFICI CHE RISULTERANNO QUINDI BLOCCATI.
LA SCELTA DEL METODO DA SEGUIRE, DEL TIPO DI ANTICORPI DA UTILIZZARE E DI ALTRI DETTAGLI TECNICI PUÒ DIPENDERE DALL’ANTIGENE CHE SI VUOLE RICERCARE O DAL TIPO DI TESSUTO ANALIZZATO.
DURANTE L’ESECUZIONE DELLA TECNICA, DEVONO ESSERE INCLUSI DEI CONTROLLI DI QUALITÀ:
- CONTROLLO POSITIVO: UTILIZZA UN TESSUTO NOTO PER ESPRIMERE L’ANTIGENE RICERCATO, RICONOSCIUTO DA QUELL’ANTICORPO, DOVE IL RISULTATO DOVRÀ ESSERE POSITIVO;
- CONTROLLO NEGATIVO: IMPIEGA UN CAMPIONE PRIVO DELL’ANTIGENE RICONOSCIUTO DA QUELL’ANTICORPO, QUI IL RISULTATO DOVRÀ ESSERE NEGATIVO;
- CONTROLLO DI SPECIFICITÀ: ANCHE DETTO “ISOTYPE MATCHED CONTROL”, SI UTILIZZA UN ANTICORPO DELLO STESSO ISOTIPO MA DIRETTO CONTRO UN ANTIGENE NON PRESENTE,
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