Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT DNA - Coggle Diagram
PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT DNA
NGUYÊN LÍ CỦA PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT DNA
Tách chiết DNA là quá trình thu thập DNA từ tế bào,mô, mẫu từ sinh vật
Nguyên liệu bắt buộc cho nhiều kĩ thuật sinh học
Tạo DNA tái tổ hợp
Giải trình tự DNA
Tách dòng gene
Nguyên lí của hầu hết các phương pháp tách chiết DNA.
Li giải tế bào
Loại bỏ các tạp chất
Thu nhận và tinh sạch DNA
Ưu điểm
Dễ thực hiện và chi phí thấp
Thu được DNA tương đối sạch
Áp dụng được cho nhiều mẫu sinh vật
Nhược điểm
Thời gian dài và có thể chứa một số hóa chất độc hại
Có thể bị đứt, gãy DNA
CÁC BƯỚC TRONG NGUYÊN LÍ TÁCH CHIẾT DNA
Li giải tế bào
Loại bỏ các tạp chất
Thu nhận DNA
DNA thu nhận bằng phenol-chloroform
Loại bỏ tạp chất ở lớp dưới, thu nhận DNA nằm trong lớp dịch nổi phía trên
DNA thu nhận bằng sắc kí cột silica
Rửa giải (sử dụng nước hòa tan DNA) để thu nhận DNA
Sử dụng ethanol hoặc isopropanol để tạo tủa DNA trong dung dịch
Li tâm tách tủa DNA
Tinh sạch DNA
Rửa tủa DNA bằng ethanol 70 độ
Cho bay hơi ethanol, thu được DNA sạch
Phương pháp phenol-chloroform
Nguyên tắc: loại bỏ protein dựa trên sự biến tính của chúng dưới tác động của phenol-chloroform
Phương pháp sắc kí cột silica
Loại bỏ tạp chất dựa trên sự khác nhau về kích thước
Phá vỡ thành tế bào, màng sinh chất, màng nhân để giải phóng các phân tư bên trong