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CITOPATOLOGIA - Coggle Diagram
CITOPATOLOGIA
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CENTRIFUGAZIONE
NEL LABORATORIO, I CAMPIONI LIQUIDI (COME LIQUIDI DI VERSAMENTO, URINE, LIQUOR O MATERIALE OTTENUTO DA LAVAGGI) VENGONO POSTI IN PROVETTE DA CENTRIFUGA E SOTTOPOSTI A ROTAZIONE CONTROLLATA,
GENERALMENTE A VELOCITÀ COMPRESE TRA 1500-3000 GIRI PER MINUTO PER UN TEMPO VARIABILE DAI 5 AI 15 MINUTI.
IL SEDIMENTO OTTENUTO, RICCO DI ELEMENTI CELLULARI, VIENE QUINDI RISOSPESO IN UNA PICCOLA QUANTITÀ DI LIQUIDO E UTILIZZATO PER LA PREPARAZIONE DEI VETRINI CITOLOGICI,
GARANTENDO UNA MAGGIORE CONCENTRAZIONE CELLULARE E QUINDI UNA MIGLIORE QUALITÀ DIAGNOSTICA DEL PREPARATO.
IL PROCESSO SI BASA SUL PRINCIPIO FISICO DELLA FORZA CENTRIFUGA CHE, APPLICATA ATTRAVERSO LA ROTAZIONE AD ALTA VELOCITÀ,
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LE CELLULE, AVENDO UNA DENSITÀ MAGGIORE RISPETTO AL LIQUIDO DI SOSPENSIONE, SI DEPOSITANO SUL FONDO DELLA PROVETTA FORMANDO UN SEDIMENTO CELLULARE CONCENTRATO (PELLET),
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RAPPRESENTA UNA TECNICA FONDAMENTALE FINALIZZATA ALLA CONCENTRAZIONE E SEPARAZIONE DELLE CELLULE PRESENTI NEL MATERIALE BIOLOGICO.
STRISCIO
NEL CASO DI CAMPIONI LIQUIDI, SI UTILIZZA UN SECONDO VETRINO (VETRINO STRISCIATRICE) CHE VIENE FATTO SCORRERE A 45 GRADI SULLA SUPERFICIE DEL PRIMO VETRINO CON PRESSIONE COSTANTE E MOVIMENTO FLUIDO,
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UNA VOLTA COMPLETATO, IL PREPARATO DEVE ESSERE IMMEDIATAMENTE FISSATO, GENERALMENTE MEDIANTE IMMERSIONE IN ALCOL ETILICO AL 95% O ATTRAVERSO SPRAY FISSATIVI,
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LA TECNICA PREVEDE IL PRELIEVO DI UNA PICCOLA QUANTITÀ DI CAMPIONE E LA SUA DISTRIBUZIONE SULLA SUPERFICIE DEL VETRINO.
LO STRISCIO CONSISTE NELLA DISTRIBUZIONE UNIFORME DEL MATERIALE BIOLOGICO SU UN VETRINO PORTAOGGETTI PER CREARE UN MONOSTRATO CELLULARE IDONEO ALL'OSSERVAZIONE MICROSCOPICA.
PROCESSO
PRIMA DELLA COLORAZIONE, IL CAMPIONE VIENE DEPARAFFINATO (CON XILOLO) E REIDRATATO CON UNA SERIE DI ALCOLI.
•INCLUSIONE IN PARAFFINA -> IL CAMPIONE VIENE POI INCLUSO IN PARAFFINA, CHE LO RENDE ABBASTANZA SOLIDO X ESSERE TAGLIATO IN FETTE SOTTILI.
LA PARAFFINA, LIQUIDA A 56°C, VIENE VERSATA SUL CAMPIONE, CHE SI SOLIDIFICA RAPIDAMENTE A BASSA TEMPERATURA, INTRAPPOLANDO IL TESSUTO.
LE FETTE, DI CIRCA 3 MICRON DI SPESSORE, VENGONO TRASFERITE SU VETRINI X L'OSSERVAZIONE AL MICROSCOPIO.
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DOPO LA COLORAZIONE, IL CAMPIONE VIENE DI NUOVO DISIDRATATO E DIAFANIZZATO.
•FISSAZIONE E PROCESSAMENTO-> UNA VOLTA FISSATO, IL CAMPIONE DEVE ESSERE RESO IDONEO X L’ANALISI MICROSCOPICA.
SI PASSA ATTRAVERSO UN PROCESSO DI DISIDRATAZIONE, CHE OGGI AVVIENE IN MODO AUTOMATIZZATO.
IL CAMPIONE VIENE IMMERSO IN UNA SERIE DI ALCOLI, PASSANDO DA CONCENTRAZIONI + BASSE A ETANOLO ASSOLUTO (100%).
DOPO LA DISIDRATAZIONE, IL CAMPIONE VIENE TRATTATO CON XILOLO, TOLUOLO O METANOLO X RENDERLO TRASPARENTE.
•TAGLIO E GESTIONE DELLA PARAFFINA -> X EVITARE PIEGHE DURANTE IL TRASFERIMENTO DELLE FETTE, VENGONO IMMERSE IN UN BAGNO TERMOSTATICO.
LA TEMPERATURA NON DEVE SUPERARE I 40-45°C, X EVITARE CHE LA PARAFFINA SI SCIOLGA O IL CAMPIONE SI REIDRATI.
•BIOPSIE ENDOSCOPICHE E CON AGO ->(PICCOLE E DELICATE) RICHIEDONO ATTENZIONE X EVITARE CHE IL CAMPIONE VENGA SMARRITO, USANDO GARZINE O SPUGNETTE.
SI PRELEVANO CILINDRI DI TESSUTO, AD ES DAL FEGATO, POLMONI O MAMMELLA, X ANALISI ISTOLOGICHE.
•MARGINI E INCHIOSTRO -> X DETERMINARE SE I MARGINI SONO LIBERI DA CELLULE TUMORALI, SI UTILIZZA L’INCHIOSTRO DI CHINA, CHE NON INTERFERISCE CON I COLORANTI ISTOLOGICI.
L’INCHIOSTRO RESTA VISIBILE ANCHE AL MICROSCOPIO, AIUTANDO A MISURARE LA DISTANZA TRA LA NEOPLASIA E IL MARGINE SANO.
MAGGIORE È LA DISTANZA, MINORE È IL RISCHIO DI RECIDIVA.
•MONTAGGIO -> IL CAMPIONE VIENE MONTATO CON UN MEZZO PROTETTIVO (ES. BALSAMO DEL CANADA O RESINE SINTETICHE COME PERMOUNT), CHE LO CONSERVA NEL TEMPO E IMPEDISCE L'OSSIDAZIONE.
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