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LABORATORIO DI FARMACOLOGIA 2 - Coggle Diagram
LABORATORIO DI FARMACOLOGIA 2
EMIT
FUNZIONAMENTO
SI BASA SU UN ANTICORPO CHE SI LEGA SPECIFICAMENTE A UN METABOLITA DELLA SOSTANZA D’ABUSO.
IL CAMPIONE (TIPICAMENTE URINE) VIENE MESCOLATO CON UN REAGENTE CHE CONTIENE UN ENZIMA LEGATO A UNA SOSTANZA SIMILE AL METABOLITA.
SE LA SOSTANZA D’ABUSO È PRESENTE NEL CAMPIONE, L’ANTICORPO SI LEGA AL METABOLITA, IMPEDENDO CHE L'ENZIMA CATALIZZI LA REAZIONE DI AMPLIFICAZIONE.
LA QUANTITÀ DI ENZIMA ATTIVO CHE RIMANE NEL CAMPIONE È INVERSAMENTE PROPORZIONALE ALLA CONCENTRAZIONE DI METABOLITI NEL CAMPIONE.
VANTAGGI
•FACILITÀ D'USO: QUESTI TEST SONO FACILI DA ESEGUIRE, NON RICHIEDONO APPARECCHIATURE COMPLESSE E POSSONO ESSERE ESEGUITI ANCHE IN AMBITO NON LABORATORISTICO.
•COSTO CONTENUTO: L’EMIT È MENO COSTOSO RISPETTO AD ALTRI METODI DI ANALISI AVANZATA COME LA CROMATOGRAFIA LIQUIDA O LA SPETTROMETRIA DI MASSA.
•VELOCITÀ: I TEST EMIT SONO RAPIDI E FORNISCONO RISULTATI IN TEMPI RELATIVAMENTE BREVI, RENDENDOLI IDEALI PER LO SCREENING PRELIMINARE.
•ALTA SENSIBILITÀ: È IN GRADO DI RILEVARE ANCHE BASSE CONCENTRAZIONI DI SOSTANZE NEL CAMPIONE, IL CHE LO RENDE EFFICACE PER IL MONITORAGGIO DELLE SOSTANZE D'ABUSO.
COS'E'
EMIT (ENZYME MULTIPLIED IMMUNOASSAY TECHNIQUE) È UN METODO DI SCREENING UTILIZZATO PER LA RILEVAZIONE DELLE SOSTANZE D'ABUSO NEL CORPO, IN PARTICOLARE NELLE URINE.
È UNA TECNICA DI IMMUNOANALISI CHE SFRUTTA UNA REAZIONE ENZIMATICAMENTE AMPLIFICATA PER IDENTIFICARE LA PRESENZA DI METABOLITI DI DROGHE NEL CAMPIONE.
LIMITAZIONI
•FALSI POSITIVI: POICHÉ L'EMIT È UN TEST DI SCREENING, PUÒ DARE FALSI POSITIVI SE ALTRE SOSTANZE NEL CAMPIONE INTERFERISCONO CON LA REAZIONE IMMUNOLOGICA.
IN QUESTI CASI, È NECESSARIA UNA CONFERMA CON TECNICHE PIÙ PRECISE COME LA CROMATOGRAFIA.
•NON QUANTITATIVO: SEBBENE MOLTO UTILE PER IL RILEVAMENTO, L'EMIT NON FORNISCE UNA MISURA PRECISA DELLA CONCENTRAZIONE DELLA SOSTANZA NEL CORPO.
VIENE QUINDI UTILIZZATO PRINCIPALMENTE PER LA RILEVAZIONE PRELIMINARE.
•INTERFERENZE: ALCUNI FARMACI O ALTRE SOSTANZE PRESENTI NEL CAMPIONE POTREBBERO INTERFERIRE CON IL RISULTATO DEL TEST.
APPLICAZIONI
•SCREENING DELLE SOSTANZE D’ABUSO: L'EMIT È FREQUENTEMENTE UTILIZZATO PER RILEVARE DROGHE COME COCAINA, MARIJUANA (THC), AMFETAMINE, OPPIACEI, BENZODIAZEPINE E ALCOL.
È AMPIAMENTE USATO IN AMBITO OSPEDALIERO, SPORTIVO, LEGALE E LAVORATIVO.
•MONITORAGGIO TERAPEUTICO: VIENE UTILIZZATO ANCHE PER MONITORARE I PAZIENTI IN TRATTAMENTO CON FARMACI CHE POSSONO INTERFERIRE CON IL SISTEMA IMMUNITARIO O ALTERARE IL METABOLISMO.
IMMUNOENZIMATICA
COS'E'
QUESTI TEST SI BASANO SU INTERAZIONI SPECIFICHE TRA ANTICORPI E ANTIGENI E UTILIZZANO UN ENZIMA PER GENERARE UN SEGNALE MISURABILE CHE CONSENTE DI DETERMINARE LA PRESENZA E LA CONCENTRAZIONE DI UNA SOSTANZA NEL CAMPIONE.
LA METODICA IMMUNOENZIMATICA SI RIFERISCE A UNA CLASSE DI TEST CHE COMBINANO IL PRINCIPIO DELL'IMMUNOASSAY CON L'USO DI ENZIMI COME MARCATORI PER RILEVARE E QUANTIFICARE SOSTANZE DI INTERESSE,
COME ANTIGENI, ANTICORPI O METABOLITI DI SOSTANZE D'ABUSO NEL CORPO.
PRINCIPIO DI FUNZIONAMENTO
QUANDO IL CAMPIONE (AD ESEMPIO URINA, SANGUE, O SALIVA) VIENE MESCOLATO CON QUESTO ANTICORPO-ENZIMA,
SE LA SOSTANZA TARGET (COME UN ANTIGENE O UN METABOLITA) È PRESENTE NEL CAMPIONE, L’ANTICORPO SI LEGA AD ESSA.
IN UN TEST IMMUNOENZIMATICO, UN ANTICORPO SPECIFICO È LEGATO A UN ENZIMA (PER ESEMPIO, LA PEROSSIDASI O LA ALCALINA FOSFATASI).
L’ENZIMA, QUINDI, CATALIZZA UNA REAZIONE CHIMICA CHE PRODUCE UN PRODOTTO COLORATO O LUMINESCENTE, IL CUI SEGNALE È DIRETTAMENTE PROPORZIONALE ALLA CONCENTRAZIONE DELLA SOSTANZA TARGET.
TIPI DI TEST IMMUNOENZIMATICI
2.EMIT (ENZYME MULTIPLIED IMMUNOASSAY TECHNIQUE): QUESTO È UN TIPO SPECIFICO DI TEST IMMUNOENZIMATICO CHE UTILIZZA UN ENZIMA PER RILEVARE METABOLITI DI SOSTANZE D’ABUSO (COME COCAINA, CANNABIS, AMFETAMINE).
EMIT È UTILIZZATO PRINCIPALMENTE PER SCREENING PRELIMINARI NELLE URINE.
3.RIA (RADIOIMMUNOASSAY): SEBBENE SIA BASATO SU UN PRINCIPIO SIMILE ALL'ELISA, IL RIA UTILIZZA ISOTOPI RADIOATTIVI COME MARCATORI AL POSTO DEGLI ENZIMI.
È MENO COMUNE OGGI A CAUSA DEI RISCHI ASSOCIATI ALLA RADIOATTIVITÀ, MA È STATO STORICAMENTE IMPORTANTE.
1.ELISA (ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY): È UNO DEI TEST IMMUNOENZIMATICI PIÙ COMUNI.
PUÒ ESSERE UTILIZZATO PER RILEVARE SIA ANTICORPI (AD ESEMPIO, IN CASO DI INFEZIONI VIRALI) CHE ANTIGENI (COME I METABOLITI DELLE SOSTANZE D'ABUSO).
L'ELISA È ALTAMENTE SENSIBILE E SPECIFICO.
VANTAGGI DEI TEST IMMUNOENZIMATICI
2.RAPIDITÀ E FACILITÀ D'USO: I TEST IMMUNOENZIMATICI SONO FACILI DA ESEGUIRE E RELATIVAMENTE VELOCI, PERMETTENDO RISULTATI IN POCHE ORE O MINUTI.
3.NON INVASIVITÀ: QUESTI TEST POSSONO ESSERE ESEGUITI SU CAMPIONI NON INVASIVI, COME URINA O SALIVA.
1.ALTA SENSIBILITÀ E SPECIFICITÀ: LA TECNICA È IN GRADO DI RILEVARE BASSE CONCENTRAZIONI DI UNA SOSTANZA TARGET CON GRANDE PRECISIONE.
LIMITI E CRITICITÀ
2.QUALITÀ DEL CAMPIONE: LA QUALITÀ DEL CAMPIONE (ES. CONTAMINAZIONE, DETERIORAMENTO) PUÒ INFLUIRE SULLA PRECISIONE DEL TEST.
3.COSTO E ATTREZZATURA: SEBBENE MENO COSTOSI DI ALTRI METODI ANALITICI AVANZATI, ALCUNI TEST IMMUNOENZIMATICI RICHIEDONO ATTREZZATURE SPECIALIZZATE, COME LETTORI PER MISURARE IL SEGNALE ENZIMATICO.
1.FALSI POSITIVI/NEGATIVI: SEBBENE ALTAMENTE SENSIBILI, I TEST IMMUNOENZIMATICI POSSONO DARE FALSI POSITIVI SE ALTRE SOSTANZE NEL CAMPIONE INTERFERISCONO CON LA REAZIONE.
PER QUESTO MOTIVO, UN TEST DI CONFERMA (COME LA CROMATOGRAFIA O LA SPETTROMETRIA DI MASSA) È SPESSO NECESSARIO.
APPLICAZIONI
I TEST IMMUNOENZIMATICI SONO AMPIAMENTE UTILIZZATI IN MEDICINA CLINICA, DIAGNOSTICA DI LABORATORIO, MONITORAGGIO DELLE SOSTANZE D'ABUSO, TEST PER ALLERGIE E DETERMINAZIONE DI MALATTIE INFETTIVE (COME HIV, EPATITE).
VENGONO ANCHE IMPIEGATI IN AMBITO SPORTIVO PER RILEVARE L'USO DI SOSTANZE DOPANTI