Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Real-time PCR - Coggle Diagram
Real-time PCR
Prep. reaction
เก็บตย.ที่สนมาสกัดDNA --->
Template DNA
Primer
= 18-30 bp ---> Forward+ Reverse
dNTPs
---> dATP dTTP dCTP dGTP
Taq DNA polymerase
Buffer
How it works
หลังจบ 3 CORE STEP จะมีการตรวจจับสารเรืองแสง(Positive test) + คอมพิวเตอร์พล็อตกราฟ
3 phases
1 Initial
2 Exponential
3 Plateau
จากกราฟจะได้ค่า Ct จากการตัดกันของ Threshold+curveจากสารเรืองแสง
ค่า Ct บอกปริมาณ(ความเข้มข้นของเชื้อ)
:star:ค่ามาก = เชื้อน้อย
:star:ค่าน้อย = เชื้อมาก
3 CORE STEP
Denaturation
:<3:
94-95C :
แยก DNA เป็นสายเดี่ยว
Annealing
:<3:
37-65C
primers เข้าจับสายDNA F+Reverse
Synthesizing
:<3:
72C
สร้างเส้นใหม่ (enz.ทำงานดี)
detect
Covid-19
structure
protein S
= spikeที่ยื่นออกจากenvelope
:!!:ส่วนสำคัญในก.ก่อโรค
:star:จับกับreceptor ACE2:star:
protein M
+
protein E
= เป็นส่วนประกอบในเยื่อ+เปลือกหุ้มไวรัส
protein N
= โปรตีนหุ้ม RNA ของไวรัส ปกป้องจากสิ่งแวดล้อม
SARS-CoV-2
collect
เก็บให้เร็วที่สุด like ช่วงเริ่มมีอาการ
กรณีรุนแรง ปอดบวม-อักเสบ
:star:
BAL
bronchoalveolar
เก็บตย.จากทางเดินหายใจ(ส่วนล่าง)=ฉีดของเหลวลงไปแล้วดูดขึ้นในช่วงสั้นๆ
กรณีท้องร่วง= เก็บอุจจาระ on ice
