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Biocell : Méthodes d'étude - P2 - Coggle Diagram

- - - - Surnag S1 : noy + débris C
      - S2 : mitoch + peroxysomes + lysosomes
      - S3 : microsomes, artéfacts membr
      - C4 : ribos libres isolés
- - - - neg, + migrent rapidement
    - - Page-SDS (oblig) : lgue partie hydrophobe et tête polaire, interga avec aas hydrophb - - > perdre struct tridi prot ; lui donne charge globale négative
        
        Migration dép uniquement de taille
      - Bêta-mercaptoéthanol (non oblig) : rompt les pts diS
      - Dépôt sur tamis moléculaire = gel de polyacry, migration à vitesse inverst prop à taille + rével sur gel : det masse moléculaire, utilisation du bleu de Coomassie pour prots et radio-marquage pour aas puis d'une autoradiographie
        
        Det M : relation linéaire entre d de migration et log de M
    - - 1) Page SDS, 2) électrotransf sur membrane de nitrocellulose (forte aff pr prots), 3) immunorévélation aide Ac (primaire : reco spé prot à révéler, secondaire : contre Ac prim, marqué par une enz, fluo ou radio-isotope)
    - - 1) Dénat des prots par détergents et molcs non chargées, 2) Focalisation isoélectrique sur gel polyacry - -> sép prots par gradients pH (migration jusqu'à zone de pH corresp au pI), 3) Page-SDS selon M, 4) coloration
      - Sép de milliers de prots
  - - - Cytokines infla, horm, marqueurs tumoraux