Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Digital PCR (dPCR), น.ส. ชนาพร ช่วยทอง 6604071630071, :red_flag: :red_flag…
Digital PCR (dPCR)
-
-
-
-
หลักการสำคัญ Digital PCR
- เป็นการกระจายโมเลกุลเข้าไปเเต่ละช่อง micro chambers แล้วเกิด PCR reaction เเละผลสุดท้ายที่ได้จะเห็นได้ว่าช่องไหนมีจำนวณ positive (มี DNA/RNA เป้าาหมาย) หรือมี negative (ไม่มี DNA/RNA เป้าหมาย)
- อ่านค่าสัญญาณfluorescence หลังจากปฏิกิริยาสิ้นสุด
- ผลที่ได้เป็น Absolute quantification รู้จำนวนโมเลกุลจริงของ target
- ทนทานต่อ PCR inhibitiors สูง
- การกระจายโมเลกุลเข้าไปใน micro chamber เป็นการกระจายเข้าไปเเบบสุ่ม ต้องใช้ Poisson’s law เพื่อคำนวณหา Absolute quantification และสามารถรู้จำนวน targer ที่มีอยู่จริงใน sample
-
:red_flag: :red_flag:เปรียบเทียบ qPCR เเละ dPCR
- dPCR สามารถตรวจวัดหา DNA เป้าหมายที่มีตัวอย่างน้อย, ไม่ต้องทำ standard curve, ทนต่อ PCR inhibitors และกูผลหลังสิ้นสุดปฏิกิริยา
- qPCR ต้องทำ standard curve สำหรับ absolute quantification, ทำให้เกิด PCE inhibition และ ดูผลเเต่ละรอบที่ทำเเบบ real time