Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Digital PCR, ⚖️ เปรียบเทียบ qPCR กับ dPCR, น.ส.ณัฐมน ส้มแก้ว รหัส…
Digital PCR
-
🔧การใช้งาน
-
-
-
ตรวจเชื้อในสิ่งแวดล้อม (น้ำเสีย, ไวรัสโปลิโอ)
ความปลอดภัยอาหาร (ตรวจเชื้อ, ตรวจหมูปนในเนื้อ)
📊 หลักการวิเคราะห์
-
การอ่านผล
- Positive chamber = 1
• มีโมเลกุลเป้าหมาย (Target DNA/RNA)
• หลังทำ PCR → ตรวจพบสัญญาณ fluorescence (เรืองแสง)
- Negative chamber = 0
• ไม่มีโมเลกุลเป้าหมาย
• หลังทำ PCR → ไม่พบสัญญาณ fluorescence
-
-
🌟 จุดเด่น
- ให้ผลแบบ “จำนวนจริง” (Absolute Quantification)
→ ไม่ใช่แค่เปรียบเทียบ แต่บอกจำนวนสำเนา DNA/RNA ที่แท้จริงในตัวอย่าง
- แม่นยำและไวมาก
→ ตรวจพบได้แม้มีโมเลกุลเป้าหมายเพียงเล็กน้อย เช่น 1 copy
- ไม่ต้องพึ่งกราฟมาตรฐาน
→ ลดความคลาดเคลื่อนจากการเตรียมมาตรฐาน และง่ายต่อการใช้งาน
- ใช้ง่าย ใกล้เคียง qPCR แต่ดีกว่า
→ ขั้นตอนคล้าย qPCR แต่ให้ข้อมูลที่ละเอียดและเชื่อถือได้มากกว่า
🧬 การพัฒนาเทคโนโลยี PCR
- PCR แบบดั้งเดิม (Conventional PCR)
• วัดผลตอนจบ → ได้แค่ “มี/ไม่มี”
• ความแม่นยำต่ำ
• รบกวนง่าย
- Real-Time PCR (qPCR)
• ดูสัญญาณระหว่างทำงาน (real-time)
• ต้องมีมาตรฐาน (Standard curve)
• ผลแปรปรวนถ้าตัวอย่างมีน้อย
- Digital PCR (dPCR)
• แบ่งปฏิกิริยาออกเป็น chamber เล็กๆ
จำนวนมาก
• วัดผลแบบ Absolute (จำนวนจริง)
• แม่นยำกว่า
• ทนต่อสิ่งรบกวน
-
-
-