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clonaggio - Coggle Diagram
clonaggio
gate away
ricombinante sito specifico
proteine ricombinasi
riconoscono e tagliano sequenza DNA
uniscono modo predeterminato
siti att
sequenze riconosciute da ricombinasi
tipi
ATT P (vettore donatore)
ATT B (frammento DNA da clonnare)
ATT L (formano dopo reazione BP)
ATT R (vettore di destinazione)
clonase
enzimi con attività ricombinazione
BP e LR
vettore donatore (plasmide con sito ATT P e ATT B)
clone d'ingresso
usato per trasferimenti
plasmide reazione BP
gene d'interesse con siti ATT L
vettore di destinazione
specifica applicazione
contiene siti ATT R, gene resistenza antibiotico e letale
clone di espressione
plasmide finale di reazione LR
reazione BP
vettore donatore con siti AAT P
BP clonase
frammenti DNA con siti ATT B
catalizza ricombinazione siti ATT P e ATT B
formazione clone d'ingresso
reazione LR
clone d'ingresso con gene d'interesse e siti ATT L
vettore destinazione
LR clonase
catalizza ricombinante siti ATT L e ATT R
formazione clone d'espressione
golden gate
assemblaggio frammenti DNA in un vettore
enzimi di restrizione di tipo 2S
tagliano DNA distanza specifica insieme a ligasi
definire con precisione le estremità da legare