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Tecniche - Coggle Diagram
Tecniche
Clonaggio genico
Obiettivo: fare molte copie di un gene.
Il gene viene inserito in un plasmide (vettore) e trasferito in un batterio.
Si usano enzimi di restrizione per tagliare il DNA e DNA ligasi per incollarlo.
Per DNA lunghi si usano BAC, YAC, virus.
Si possono introdurre geni anche in cellule animali e vegetali.
Analisi del DNA e editing
Sequenziamento: legge il codice genetico.
DNA fingerprinting: confronta DNA (es. test di paternità).
Editing genetico (CRISPR-Cas9): taglia/modifica il DNA in punti precisi.
Biotecnologie e DNA ricombinante
Biotecnologie: tecniche che usano organismi o loro componenti per scopi utili (es. produrre farmaci, modificare piante).
Tradizionali: selezione artificiale, fermentazione.
Moderne: modificano direttamente il DNA usando la tecnologia del DNA ricombinante.
OGM: organismi modificati geneticamente per scopi agricoli o medici.
Librerie di DNA
Insiemi di DNA clonati:
genomiche:da DNA totale.
cdna: da mRNA → studiano geni espressi.
Separazione e amplificazione del DNA
Elettroforesi: separa DNA/proteine per dimensione e carica.
Sonde nucleotidiche: identificano sequenze specifiche con fluorescenza.
PCR: copia milioni di volte un frammento di DNA in laboratorio (denaturazione – primer – estensione con Taq polimerasi).