Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Reaksi Antigen-Antibodi - Coggle Diagram
Reaksi Antigen-Antibodi
Imunohistologi
-
Indirect
fluoresen kedua antibodi spesifik untuk antibodi primer digunakan untuk mendeteksi antibodi anti virus primer dan menemukan antigennya
Presipitasi
-
Double immunodiffusion
PRINSIP: peneliti memotong lubang silinder yang disebut sumur di pelat agar. Satu sumur diisi dengan larutan antigen dan sumur lainnya diisi dengan larutan antibodi terhadap antigen. Molekul antigen dan antibodi berdifusi ke segala arahkeluar dari sumur dan ke agar di sekitarnya, dan di tempat merekabertemu dalam proporsi optimal, garis presipitasi muncul. Jika larutan mengandung banyak antigen dan antibodi yang berbeda, setiap pasangan reaktan komplementer mencapai proporsi optimal pada posisi yang berbeda, dan banyak garis presipitasi dihasilkan—satu untuk setiap pasangan antigen-antibodi yang berinteraksi.
-
Elektroforesis roket
PRINSIP: Antigen dipisahkan dengan elektroforesis ke dalam gel agar yang mengandung antibodi. Panjang "roket" menunjukkan konsentrasi antigen
Imunoelektroforesis
PRINSIP:Antigen ditempatkan dalam sumur dan dipisahkan dengan elektroforesis. Antibodi kemudian ditempatkan di palung, dan garis presipitin terbentuk saat antigen dan antibodi berdifusi satu sama lain.
Flow cytometer
teknologi yang mampu menyediakan analisis dengan berbagai parameter menggunakan sampel sel dalam sebuah larutan. Teknologi flow cytometer dapat dengan cepat menganalisis sebuah sel saat dialirkan dalam larutan khusus dan melalui laser tunggal atau ganda. Metode ini digunakan untuk mendeteksi, mengidentifikasi, dan menilai karakteristik sel tertentu hingga mengidentifikasi komponen di dalamnya.
Agglutinasi
DEFINSI:proses di mana antigen spesifik (misalnya, sel darah merah) berkumpul untuk membentuk gumpalan yang terlihat lebih besar ketika antibodi spesifik yang sesuai ada dalam serum.
PRINSIP:Aglutinasi adalah agregasi partikel yang terlihat yang disebabkan oleh kombinasi dengan antibodi spesifik. Antibodi ini disebut agglutinin.
Jenis partikel : eritrosit, bakteri atau partikel latex.
Langkah agglutinasi
Pertama: Fase pertama aglutinasi yaitu sensitisasi, menunjukkan perlekatan fisik molekul antibodi dengan antigen pada membran eritrosit. Kombinasi antigen dan antibodi merupakan reaksi kimia reversibel. Ketika kondisi fisik sengaja dimanipulasi untuk memecah kompleks antigen-antibodi, dengan pelepasan antibodi selanjutnya ke media sekitarnya, prosedur ini disebut sebagai elusi. Tingkat hubungan antara antigen dan antibodi dipengaruhi oleh berbagai faktor dan dapat diubah dalam beberapa kasus in vitro dengan mengubah beberapa faktor yang mempengaruhi hubungan antigen-antibodi
Langkah kedua, atau Formasi kisi / lattice formation adalah pembentukan ikatan silang yang membentuk agregat yang terlihat. Ini mewakili stabilisasi antigen-antibodi kompleks dengan pengikatan bersama dari beberapa determinan antigenic.
Pembentukan kisi, atau pembentukan ikatan silang antara partikel peka (misalnya, eritrosit) dan antibodi yang menghasilkan agregasi, adalah proses yang jauh lebih lambat daripada fase sensitisasi. Pembentukan ikatan kimia dan pembentukan kisi yang dihasilkan bergantung pada kemampuan sel dengan antibodi yang melekat pada permukaannya untuk cukup dekat dengan sel lain untuk memungkinkan molekul antibodi menjembatani celah dan bergabung dengan situs reseptor antigen pada sel kedua. Saat antigen dan antibodi bergabung, kisi multimolekul bertambah besar hingga mengendap dari larutan sebagai partikel padat. Tautan silang dipengaruhi oleh faktor-faktor seperti potensi zeta.
Macam-macam agglutinasi
Aglutinasi langsung
DEFINSI: Aglutinasi langsung adalah suatu metode diagnostic yang melibatkan reaksi antara antigen dan antibodi yang terjadi secara langsung. Pengujian aglutinasi langsung melibatkan antigen bakteri yang diketahui digunakan untuk menguji keberadaan antibodi yang belum diketahui pada pasien. Deteksi antibodi terutama digunakan dalam diagnosis penyakit yang agennya bakteri.
WIDAL
DEFINISI: tes aglutinasi yang digunakan untuk diagnosis demam enterik (demam tifoid atau paratifoid) secara serologis di laboratorium. Tes ini mengukur tingkat antibodi serum aglutinasi yang diproduksi terhadap antigen O (somatik) dan H (flagela) dari Salmonella Typhi dan Paratyphi A, B, dan C.
PRINSIP: jika ada antibodi tertentu dalam serum, antibodi tersebut akan bereaksi dengan antigen tertentu dan menunjukkan penggumpalan yang terlihat. ketika antibodi dalam serum terhadap antigen O dan H Salmonella Typhi dan Paratyphi bereaksi dengan antigen O dan H yang tidak larut yang ada dalam reagen uji, maka reaksi penggumpalan yang terlihat (aglutinasi) terjadi. Kadar antibodi terhadap antigen ini akan mencapai puncaknya setelah 6-8 hari infeksi. Tes ini didasarkan pada bukti adanya aglutinin (antibodi) dalam serum pasien yang terinfeksi, terhadap antigen H (flagel) dan O (somatik) dari Salmonella Typhi.
Metode
-
-
Metode Tube Aglutinasi.
Interpretasi: Titer antibodi dibaca sebagai pengenceran serum tertinggi yang memberikan reaksi positif (aglutinasi yang terlihat). Titer antibodi yang lebih besar dari 1:80 dianggap signifikan
Aglutinasi pasif.
Aglutinasi pasif atau tidak langsung, menggunakan partikel yang dilapisi dengan antigen yang biasanya tidak ditemukan pada permukaannya. Berbagai partikel, termasuk eritrosit, lateks, dan gelatin, digunakan untuk aglutinasi pasif.
-
Aglutinasi inhibisi
PRINSIP: Reaksi penghambatan aglutinasi didasarkan pada kompetisi antara partikel dan antigen terlarut untuk situs penggabungan antibodi terbatas. Tidak adanya aglutinasi merupakan indikator reaksi positif
Hemaglutinasi
DEFINISI: Reaksi aglutinasi yg melibatkan penggumpalan sel darah merah. Melibatkan antigen permukaan sel darah merah dan antibodi komplementernya. Virus tertentu, seperti virus penyebab gondongan, campak, dan influenza, memiliki kemampuan untuk mengaglutinasi sel darah merah tanpa reaksi antigen-antibodi; proses ini disebut hemaglutinasi virus. uji ini untuk menetukan titer virus yg digunakan pd uji HI
Interpretasi: Endapan titik merah pertama kali akan muncul pd well terbawah titik merah muncul berurutan ke well atas (sesuai gradien konsentrasi virus semakin sedikit konsentrasi virus, makin sedikit RBS yg berikatan dgn antigen virus . Pengamatan dihentikan saat well kontrol telah terbentuk titik juga contoh: bila dari hasil pengamatan menunjukkan berhenti pada pengenceran 1/8 (well D1-2) = titer virus adalah 8 HAU
Hemaglutinasi Inhibisi
DEFINISI:pemeriksaan serologis yang membuktikan pembentukan antibodi spesifik hemaglutinin (HA) dari virus (cth: H1N1) dalam serum darah. Jika terdapat antibodi spesifik terhadap virus, maka antibodi ini akan mengikat antigen (terbentuk kompleks Ag:Ab), sehingga antigen tidak dapat mengikat sel darah merah. Aglutinasi (penggumpalan) sel darah merah/RBC yang disebabkan oleh virus tidak terjadi.
Interpretasi: eritrosit mengendap jatuh ke dasar plate karena tidak diikat oleh antigen virus. Antigen virus telah berikatan dgn Antibodi di dalam serum tidak terjadi aglutinasi eritrosit Uji HI (+) Endapan pasir di dasar plate = virus berikatan dengan eritrosit terjadi aglutinasi menandakan uji HI (-) karena tidak ada antibodi dlm serum yang berikatan dengan antigen virus
Fiksasi komplemen
PRINSIP: . Dalam tes ini, serum pasien direaksikan dengan antigen dan komplemen. Kompleks antibodi-antigen mengikat, mengaktifkan, dan menggunakan komplemen. Komplemen sisa kemudian diuji melalui lisis sel darah merah yang dilapisi dengan antibody.
Radioimmunoassay
uji in vitro yang mengukur keberadaan antigen dengan sensitivitas tinggi. Keberadaan antigen dan antibodi dapat ditentukan dan diukur bahkan dalam konsentrasi yang sangat kecil. Tes RIA menganalisis antigen atau antibodi apa pun dalam serum pasien untuk mendiagnosis penyakit.
ELISA
Prinsip: reaksi antara antibodi dengan antigen dan reaksi antara enzim dengan substrat. Menggunakan antigen yang diimobilisasi pada permukaan ‘well’, manik-manik, atau filter untuk menangkap dan memisahkan antibodi spesifik dari antibodi lain dalam serum pasien dengan enzim (misalnya, horseradish peroksidase, alkaline phosphatase, beta-galactosidase) kemudian mendeteksi antibodi pasien yang ditempelkan.
-
-
-
-
Western blot
PRINSIP: protein virus dipisahkan oleh elektroforesis menurut berat molekul atau muatannya dipindahkan ke kertas saring (misalnya, nitroselulosa, nilon)
Saat terkena serum pasien, protein yang tidak bergerak menangkap antibodi spesifik virus dan divisualisasikan dengan antibodi antihuman terkonjugasi dengan enzim
Cara Kerja: Protein dipisahkan oleh natrium elektroforesis gel dodesil sulfat-poliakrilamida lalu dipindahkan ke kertas nitroselulosa (NC), dan diinkubasi dengan antiserum spesifik antigen atau antiserum pasien (1 Ab) dan kemudian serum antihuman terkonjugasi enzim (2 Ab). Konversi enzim dari substrat mengidentifikasi antigen.
Tubex
DEFINISI:Tes diagnostik in vitro, yang didasarkan pada deteksi dini antibodi Salmonella typhi IgM anti-O9 dalam serum. Tes ini menggunakan teknologi uji semi-kuantitatif, yang merupakan teknologi uji sederhana berdasarkan interpretasi visual. Dapat dilakukan di lingkungan laboratorium apa pun dan hasilnya siap dalam waktu 10 menit. Deteksi patogen Salmonella Typhi, penyebab tifoid.
PRINSIP:Antibodi IgM spesifik terhadap antigen S. Typhi LPS, dicampur dengan blue latex antibody-coated indicator particle yang dikelilingi anti-S.Typhi LPS (O9) antibody, kedua jenis partikel saling berikatan.
Jika terjadi perubahan warna biru ke merah : tidak ada anti- S. Typhi O9 antibody pada serum pasien tidak menderita tifoid.
Interpretasi: <= 2: Negatif, 3: Border line (ulang pemeriksaan), 4:Positif lemah, 6-10: Positif
Typhidot
PRINSIP:Typhidot bekerja berdasarkan deteksi antibodi IgM dan IgG terhadap antigen spesifik Salmonella Typhi. Antigen yang digunakan dalam tes ini adalah protein OMP (Outer Membrane Protein) dari bakteri tersebut.
-
-