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Microbiologia e Imunologia Clínica - Coggle Diagram
Microbiologia e Imunologia Clínica
Cocos Gram positivos, catalase positiva
ÁGAR SANGUE
Gram - 2 lâminas
Violeta (1 min), lugol (1 min), Alcool, Fucsina
Fixar em chama
Staphylococcus- Cachos/ Estreptococcus - colar Enterococcus - cadeia, aos pares
Semeadura
Estrias de 4 quadrantes
Incubação a 35ºC por 24h em estufa
Tipos de Lise
Lise total (beta)
S. pyogenes, S. agalactiae, Listeria, S. aureus, S.haemolyticcus, Enterococcus.
Halo de transparência amarelo
Lise parcial (alfa)
Halo com coloração verde
S. viridans, S. pneumoniae, Enterococcus.
Ausência de Lise (gama)
Meio inalterado
Enterococcus, Estafilococos coagulase negativo.
Catalase
Positivo - faz coagulase (S. Aures)
negativa - Streptococcus/Enterococcus
Oxidase - se der positivo (Não-fermentador)
Coagulase
Positiva - S. aureus
Negativa
nevobiocina
Saprophyticus - Resistente
Epidermidis - Sensível (algumas são resistentes)
Descrever características morfológicas
ÁGAR CHOCOLATE
Urocultura
Imergir a alça calibrada de 0,01ml ou 0,001ml na urina de forma vertical
Semear em placa de ágar sangue e EMB (ou EMB e Cled)
Incubar a 35ºC por 18 a 24 horas
Estria inicial em linha reta e estrias perpendiculares
Crescimento com alça de 0,001ml ou 1ul (1:1.000), uma colônia na placa corresponde a 1.000 ou 10³ UFC/ml.
Crescimento com alça de 0,01ml ou 10ul (1:100), uma colônia na placa corresponde a 100 ou 10² UFC/ml.
< 10.000 UFC/ mL = contaminação
10.000 a 90.000 UFC/ mL = suspeita de infecção
100.000 UFC/ mL = indícios de infecção
ÁGAR CLED
Colônias amarelas indicam que as bactérias fermentam lactose
Colônias incolores ou azuis indicam que as bactérias não fermentam lactose
Inibe véu de proteus
Cocos Gram positivos, catalase negativa
Hemólise
beta - Grupos A, B, C e G;
gama - Grupos B, D e grupo viridans.
alfa - Streptococcus pneumoniae, grupo D, grupo viridans;
Prova de Bacitracina
Identificação de grupo A
AS
Disco de bacitracina e incubar por 24 horas a 37ºC com 10% de CO2.
Prova de CAMP
Identificação do grupo B
Estria em AS com um estafilococo produtor de B-lisina (S. aures) e outra perpendicular com a amostra a ser analisada
Incubar por 24 horas em estufa a 35°C+/- 2°C em ar ambiente.
Se não houver a formação da "seta", indica resultado negativo para Streptococcus agalactiae, e a cepa semeada não pertence ao grupo B.
Prova da bile esculina
identificação de enterococos e Streptococcus spp.
Perfurar o meio de ágar bile esculina com um fio e fazer uma estria na superfície.
.
Incubar por até 48h horas em estufa a 35°C+/- 2°C
Streptococcus pyogenes -> inalterado
Enterecoccus faecalis -> Meio enegrecido
Meio original -> cor de palha
Prova do caldo hipercloretado
identificação de enterococos
Inocular a cepa diretamente no caldo com uma alça
Incubar por até 48h horas em estufa a 35°C+/- 2°C
Resultado positivo -> cor tuva
Resultado negativo -> cor límpida
Prova da optoquina
Identificação de Streptococcus pneumoniae
Sensível à optoquina (halo de inibição > 14mm)
Incubar em estufa de CO2 por 24 horas.
Repicar uma colônia em AS fazendo estrias bem próximas umas das outras em 3 direções, colocar um disco de optoquina de 5mg
Prova da bile solubilidade
identificação de Streptococcus pneumoniae
Prepara-se uma suspensão bacteriana em 2ml de salina na escala 1 de McFarland, dividir a suspensão colocando 1ml em outro tubo estéril. Em um dos tubos coloca-se 1ml de desoxicolato a 10% e
no outro, 1ml de salina.
Incubar a 37ºC por 30 minutos, e observar
até duas horas.
Positivo -> tubo de seoxicolato límpido e de salina turvo
Negativo -> ambos tubos turvos
Coprocultura
E. coli
Fermentador de lactose - MacConkey rosa pink
SS ficará laranja, devido fermentação
Campilobacter
Fazer esfregaço em lâmina e corar com fucsina de Ziehl ou safranina. Pode ser observados bacilos rosa, em forma de vírgula
Salmonella spp
Não fermentador - SS: Colônias incolores com centros pretos
MacConkey fica incolor
Shigella
SS: Colônias incolores
Não fermentador
MacConkey fica incolor
Meios: MacConkey (fermenta - rosa, não fermenta - amarelo), SS, Caldo selenito
Ágar SS - Semear paralelo a MacConkey. Cor do meio é vermelho alaranjado.
Caldo de enriquecimento - semear 3 a 4 alçadas - Incuba por 18 - 24 h. Se ocorrer turvação em qualquer um dos caldos, cresceu salmonella
Verificar padrão TSI na tabela de cada Microorganismo
Pode ser realizada a prova de aglutinação. A depender don tipo de amostra forma grumos, indicando positividade de bactéria.