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TECNICHE DI LABORATORIO PER PROTEINE (CAP. 17) - Coggle Diagram
TECNICHE DI LABORATORIO PER PROTEINE (CAP. 17)
ESTRAZIONE PROTEINE
OMOGENIZZAZIONE
FRANTUMAZIONE TESSUTO IN TAMPONE
OMOGENIZZATORE DI POTTER-ELVEJHEM
CENTRIFUGAZIONE DIFFERENZIALE
PURIFICAZIONE
SALTING OUT
SOLFATO D'AMMONIO
CROMATOGRAFIA SU COLONNA
FASE
STAZIONARIA
MOBILE
PER ESCLUSIONE MOLECOLARE= FILTRAZIONE SU GEL
PER AFFINITA'
LIGANDO
A SCAMBIO IONICO
SCAMBIATORE DI ANIONI o CATIONI
CONTROIONI
ELETTROFORESI
POLIACRILAMMIDE
GEL NATIVO
SDS/PAGE
DETERGENTE SODIO DODECISOLFATO = SDS
GEL DISCONTINUO
RUNNING GEL
STACKING GEL
BLU COOMASIE
ELETTROFORESI BIDIMENSIONALE
FOCALIZZAZIONE ISOELETTRICA
DETERMINAZIONE STRUTTURA PRIMARIA PROTEINA
QUALI AMMINOACIDI E IN CHE PROPORZIONI
HCL
ANALIZZATORE AMMINOACIDI
CROMATOGRAFIA A SCAMBIO IONICO
IDENTITA' AMMINOACIDI N- / C-TERMINALI
FRAMMENTI
DEGRADAZIONE DI EDMAN
= DETERMINAZIONE SEQUENZA PER IDROLISI AMMINOACIDI
FRAMMENTI DI 20-30 AMMINOACIDI
SOVRAPPOSIZIONE SEQUENZE PEPTIDI -> DEDUZIONE SEQUENZA PROTEICA
VA TENUTO CONTO DI PROTEINE CON PIU' CATENE POLIPEPTIDICHE
REAGENTE DI EDMAN= FENIL ISOTIOCIANATO
OPPURE DA SEQUENZA DNA GENE CODIFICANTE
SCISSIONE PROTEINE
TRIPSINA
CHIMOTRIPSINA
BROMURO DI CIANOGENO