Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Técnicas de complejidad variable para evaluar la absorción de fármacos -…
Técnicas de complejidad variable para evaluar la absorción de fármacos
La absorción de un principio activo por vía oral implica el paso del fármaco desde el intestino hacia la sangre a través de la membrana intestinal
El fármaco primero debe ser liberado de la forma farmacéutica y posteriormente disolverse en los fluidos fisiológicos
La absorción intestinal depende de:
Solubilidad del fármaco
Proceso de disolución del fármaco
Permeabilidad a través de la mucosa intestinal
Tiempo de tránsito intestinal
El epitelio intestina
l
Mucosa intestinal
Mucosa muscularis
Lámina continua de músculo uniforme con un espesor de 3 a 10 células
Lámina propia
Tejido conectivo dentro del villus que provee soporte y nutrición a la capa de células epiteliales. Permite el transporte de las sustancias absorbidas hacia circulación sistémica
Capa de células epiteliales
Monocapa que contiene células madre que proliferan y migran a lo largo del eje cripta-villus, para posteriormente diferenciarse a diferentes tipos de células
Membrana apical
Membrana basolateral
Mecanismos de Transporte de Fármacos a Nivel Intestinal
Difusión pasiva
Paso de sustancias susceptibles de disolverse según un gradiente (de mayor a menor concentración o electroquímico) hasta llegar a un estado de equilibrio
Obedece a la ley de difusión de Ficik
Difusión transcelular (difusión simple)
Principal vía de transporte de los compuestos hidrofóbicos
Involucra el movimiento de las moléculas de soluto a través de la membrana apical, el citoplasma y la membrana basolateral
Transporte paracelular (difusión vía uniones estrechas)
Transporte a través del epitelio por medio de las uniones estrechas formadas entre las células
Depende del gradiente de potencial electroquímico, el potencial eléctrico y la presión hidrostática
Transporte mediado por acarreadores (difusión facilitada)
Mediada por acarreadores o transportadores expresados por la mucosa intestinal
El transporte se realiza en sentido del gradiente de concentración y sin ningún gasto de energía
Difusión activa
Requiere energía
La velocidad de transporte no depende del gradiente de concentración
Transporte activo mediado por acarreadores (con gasto de energía)
Requiere de un transportador, que es una proteína de membrana capaz de formar un complejo con la molécula del fármaco
Transporte por vesículas (transocitosis que incluye a la pinocitosis)
Endocitosis de fase fluida (pinocitosis)
Las moléculas de soluto disueltas en el fluido luminal son incorporados a las vesículas endocíticas, originando pinosomas (vesículas) que migran hacia los endosomas
Endocitosis mediada por receptores
Involucra la unión de la macromolécula a un receptor de membrana y la unión subsecuente del complejo receptor-ligando
Transocitosis
Ocurre cuando el ligando disuelto en la vesícula endocítica atraviesa los lisosomas y es liberado a través de la membrana basolateral
Mecanismos de Eflujo (proteínas que expulsan a los fármacos
Media la expulsión de compuestos del citoplasma celular hacia el lumen intestinal
Los transportadores de eflujo confieren al intestino la capacidad de limitar la absorción
Modelos experimentales para estudiar la permeabilidad
In Sílico
QSAR (Relaciones cuantitativas de estructura-actividad)
ROF (Rule of five)
PSA (área de superficie polar)
NPSA (área de superficie no polar)
QMRplus (Quantitative Molecular Permeability Relationships)
Gastroplus
iDEA (In vitro Determination for the Estimation of ADME)
In Vitro
Métodos Fisicoquímicos
Determinación de la lipofilicidad determinando el logaritmo del coeficiente de partición entre octanol y agua (logPo/w)
Métodos con Membranas Artificiales
Membranas Artificiales Inmovilizadas (MAI)
Columnas cromatográficas de fase reversa en las cuales la cubierta hidrocarbonada del soporte sólido es reemplaza por lípidos para imitar el ambiente de la membrana celular
La permeación de solutos a través de la membrana celular es dependiente de su partición en las capas lipídicas
Tiempos de ensayo más cortos
Ensayo de Permeación con Membranas Artificiales en Paralelo (PAMPA)
Provee rápidamente la información sobre la permeabilidad de fármacos cuya vía de absorción sea por transporte pasivo
No requiere cuantificar a los fármacos por cromatografía líquida de alta resolución
Su simplicidad, costo y amplio rango de pH de trabajo, ha hecho a este modelo atractivo
Modelos empleando líneas celulares
Líneas celulares MDCK (Madin Darby Canine Kidney)
Forman monocapas polarizadas y desarrollan uniones estrechas similares a las intestinales
Menores tiempos de cultivo
Gran homogeneidad morfológica
Resistencia eléctrica transepitelial (parecida a la del intestino delgado)
Líneas celulares Caco-2
Presenta carcaterísticas semejantes a las del intestino humano (uniones estrechas y microvilllus)
Expresa enzimas intestinales (aminopeptidasas, estereasas, sulfatasas y citocromo P450)
Expresa transportadores (de ácidos biliares, de aminoácidos, de biotina, de ácidos monocarboxílicos, PEPT1 y Pgp)
Simula de manera muy completa los dos tipos de barrera: bioquímica y fisicoquímica
Puede cultivarse sobre un soporte poroso o un filtro en el que se forma la monocapa celular polarizada
Otras líneas celulares
NCI-N87
2/4/A1
HT29
T84
IEC-18
Tejidos extraídos
Perfusión en segmentos de intestino
Se calcula la permeabilidad al cuantificar la desaparición del compuesto del lumen intestinal
Usada parra estudiar diferencias segmentales en la absorción y metabolismo sin la interferencia de factores fisiológicos
Requiere grandes cantidades del compuesto
Forma más directa de medir la permeabilidad intestinal en humanos
Intestino invertido
Incluye a la mucosa y a las capas musculares subyacentes
Presenta complicaciones en cuanto a la viabilidad de los tejidos por tiempos prolongados
Poca reproducibilidad
Enterocitos aislados
Las células se preparan cortando un segmento de intestino y tratando su superficie de mucosa con enzimas, agentes quelantes y/o mecánicos
Utilidad limitada
Pueden ser usadas para estudiar la captación del fármaco
In vivo
El uso de ratas ha llevado a que actualmente existan amplias bases de datos que pueden ser útiles para realizar predicciones
Los ratones modificados genéticamente para generar órganos humanizados resultan muy atractivos para los estudios tanto farrmacológicos como farmacocinéticos
