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RIPRODUZIONE E CRESCITA (cap. 5) - Coggle Diagram

- - - - TIPI DI TERRENI SPECIFICI PER L'IDENTIFICAZIONE
        
        Differenziali
        
        Sono tutti quei terreni che contengono sostanze indicatrici (ad es. coloranti) di particolari reazioni biochimiche che avvengono nel terreno stesso, che ci permettono di differenziare due o più colonie diverse.
        Un esempio è MSA (Mannitol salt agar) per lo Staphylococcus aureus. È un terreno sia differenziale che selettivo poiché contiene un’alta concentrazione di sale e infatti, oltre agli stafilococchi, nessun tipo di batterio riesce a crescere ad una concentrazione tale. Il colore iniziale della piastra è il rosa, in seguito sono aggiunti il mannitolo e il rosso fenolo, e qualora uno degli Strafilococchi fermenti, la piastra vira al giallo.
        
        Elettivi
        
        Sono terreni sui quali, pur sviluppandosi diverse specie microbiche, la specie di elezione cresce in un tempo più breve. Dopo 18-24 ore ho quindi solo determinati microrganismi (di
        elezione), oltre il quale noterò la crescita anche di altre tipologie batteriche.
        Un esempio è il Siero di Loeffler per i batteri della difterite.
        
        MACCONKEY AGAR
        E' un terreno elettivo (perché ci sono i Sali biliari), selettivo (perché c’è l’esculina che si trova nei vegetali, soprattutto nelle castagne) e differenziale (invece del mannitolo è presente il
        lattosio) utilizzato per l’identificazione degli enterobatteri e per differenziare Escherichia coli e Klebsiella; infatti, questi ultimi fermentano il lattosio presente nel terreno.
        Contiene anche un indicatore di viraggio (rosso neutro), il cristal-violetto (che inibisce la crescita dei batteri Gram-positivi) e bile (che inibisce la crescita dei batteri Gram-negativi diversi dagli enterobatteri).
        Quando questi batteri fermentano il lattosio, le colonie virano e diventano quasi rosso porpora.
        
        Selettivi
        
        Sono terreni che contengono sostanze batteriostatiche che inibiscono o rallentano lo sviluppo di molte specie microbiche.
        Un esempio è il terreno di Lowestien Jensen per i batteri della tubercolosi.
        
        ENTEROCOCCOSEL AGAR
        E' un terreno selettivo usato per isolare gli Streptococchi di gruppo D (Enterococchi); tale terreno contiene, oltre al terreno base (infuso di carne), agar, esculina e cloruro di ferro: l’idrolisi dell’esculina indotta dagli Enterococchi determina la precipitazione di ferro e l’annerimento del terreno.
        
        MANNITOL SALT AGAR
        E' un terreno selettivo impiegato per l’identificazione degli Stafilococchi, inibisce la moltiplicazione dei batteri Gram-negativi per la presenza di NaCl 7.5%, inoltre con tale terreno è possibile mettere in evidenza Stafilococchi mannitolo fermentanti (S. aureus, S.simulans, S. saprophyticus) per il viraggio di un indicatore (il rosso fenolo che vira al giallo in seguito alla
        presenza di radicali acidi liberati dalla fermentazione del mannitolo) presente nel terreno.
        
        AGAR SANGUE
        E' un terreno non selettivo per microrganismi più esigenti, permette la coltivazione e il mantenimento di una varietà di microrganismi che necessitano di fattori di accrescimento e
        permette anche l’individuazione di attività emolitica. Il sangue utilizzato proviene da animali (montone, pecora) non trattati con agenti antimicrobici, viene aggiunto (5-10%) sterilmente al terreno base (Trypticase soy agar o Columbia agar).
        In base all'attività emolitica i batteri vengono distinti in:
        
        Alfa emolitici, che hanno il 30/40% di emolisi, che danno un colore leggermente verdino;
        
        Beta emolitici, sono quelli classici;
        
        Gamma emolitici, che nonostante il nome non posseggono effettivamente attività emolitica.
        
        SABOURAUD AGAR
        E' un terreno simile al Micosel e permette lo sviluppo di lieviti e muffe; è preparato ad un pH acido 5.6 (di solito i batteri crescono ad un pH neutro), ed è considerato un terreno povero per mancanza di fattori di accrescimento, talvolta è supplementato di glucosio e di antibiotici per ridurre l’inquinamento batterico.
        
        AGAR CIOCCOLATO
        E' costituito da terreno base (agar sangue) a cui si aggiunge sangue sterile a caldo, così da emolizzare gli eritrociti, poiché viene utilizzato per lo sviluppo di microrganismi esigenti (Neisseria, Brucella, Haemophylus, ecc.), che non hanno attività emolitica.
        Se richiesto per lo sviluppo del microrganismo, la piastra
        dopo la semina viene incubata in presenza di CO2 (5-10%). Un esempio di agar cioccolato è il terreno di Thayer Martin agar, a cui si aggiunge, dopo sterilizzazione, un complesso di fattori di
        accrescimento e una miscela di antibiotici, quali vancomicina, colistina, nistatina, inibenti rispettivamente germi Gram-positivi, Gram-negativi e miceti. Tale terreno favorisce, in condizioni
        ottimali adatte, lo sviluppo di Neisseria gonorrhoeae e N. meningitidis.
    - - Distinzione in base alla funzione
        
        Terreni con funzione di mantenimento
        
        Permettono la conservazione del batterio, e il suo mantenimento per il periodo di tempo necessario. In passato erano costituiti da Agar molle, ad oggi si utilizza glicerolo con congelamento a -20°C, con ripristino del batterio ogni 2 anni, o a -70°C, temperatura che permette invece di conservare il batterio anche per 15 anni.
        
        Terreni di trasporto
        
        Sono semisolidi, non posseggono importanti caratteri nutrizionali, in quanto la loro funzione è quella di permettere la vitalità del
        microrganismo per il tempo necessario per il trasporto dal reparto dal quale è stato isolato.
      - Distinzione in base alla consistenza
        
        Terreno liquido e/o brodo nutritivo
        
        È costituito da elementi nutritivi, in genere un carboidrato (un destrosio) o una fonte di carbonio organico come digerito peptico di tessuto animale (peptone), digerito pancreatico di caseina o
        gelatina, disciolti in acqua distillata alle concentrazioni richieste.
        
        Terreno solido, agarizzato
        
        È costituito da componenti del brodo a cui si aggiunge agar (1.5-2%), un polisaccaride formato da più molecole di galattosio estratto da alcune alghe marine e non utilizzato dai batteri come elemento nutritivo, utile solo a rendere solido il terreno liquido. L’agar passa allo stato liquido alla T di circa 100°C, rimane in tale stato fino a circa 45°C e solidifica a temperatura ambiente.
        
        Terreno semisolido
        
        È generalmente utilizzato per individuare la motilità microbica; è costituito da brodo a cui si aggiunge agar in percentuale (0.3-0.5%) inferiore a quella che si utilizza per il terreno solidificabile.
      - Vi è un'ulteriore classificazione in base alla composizione:
        Per quanto riguarda i terreni chimicamente definiti, come suggerisce il loro stesso nome, si conosce l’esatta composizione; nel caso invece dei terreni complessi non si conosce l’esatta composizione in quanto i composti biologici sono rappresentati da sangue, latte, lievito o estratti di carne.