Atto I: Si svolge nella Chiesa di Sant'Andrea della Valle a Roma. Cesare Angelotti, un prigioniero politico, si rifugia nella chiesa. Mario Cavaradossi lo aiuta a nascondersi. Floria Tosca arriva e si ingelosisce vedendo una donna dipinta nel quadro di Mario, ma lui la rassicura del suo amore. Il barone Scarpia, il capo della polizia, arriva alla chiesa in cerca di Angelotti e sospetta di Mario. Scarpia inizia a manipolare Tosca, insinuandole dubbi sulla fedeltà di Mario per attirarla nella sua trappola.