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TECNICHE DI LABORATORIO - Coggle Diagram
TECNICHE DI LABORATORIO
ANTICORPI
peculiare specificità
MONOCLONALI
cloni identici di una sola cellula progenitrice
altamente specifici mirano ad un solo epitopo
IBRIDOMI
linfocita B fuso con cellula tumorale
stabili
producono altri monoclonali
POLICLONALI
miscela di varianti di anticorpi
molti epitopi
EMOAGGLUTINAZIONE
virus influenzale lega l'acido sialico sugli eritrociti
virus dell'influenza lega emoagglutinina
con virus che fanno ponte tra eritrociti
FONTI DI ANTICORPI
3)purificazione anticorpi
4)ottengo POLICLONALI
2)seconda immunizzazione dopo 10-15gg
1)immunizzazione topo
1)immunizzazione animale
4)aggiunta sostanze promotrici di fusione cellulare
2)prelievo milza con linfociti B in differenziazione
3)unione linfociti e cellule tumorali
6)ottengo MONOCLONALI
5)IBRIDOMA in coltura si replica
SAGGI IMMUNOLOGICI
AGGLUTINAZIONE
antigeni in sospensione+anticorpi=addensamenti
ELISA
2)siero nel pozzetto
3)posizionamento in soluzione fisiologica
1)piastrina con antigene
4)aggiunta anticorpi secondari,anti-anticorpo
test di immunoassorbimento associato a un sistema enzimatico
5)colorazione=presenza anticorpi
elisa a sandwitch
problema con cross reactivity
PRECIPITAZIONE
anticorpi in soluzione + centrifugazione = precipitato
NEUTRALIZZAZIONE
siero con anticorpi+soluzione con antigene
posiziono in pozzetti con colture sensibili
verifico avvenimento infezione
TITOLAZIONE PER PLACCHE
BATTERIOFAGI
cellula ospite infettata in sospensione
trasferita su piastra di agar
batteri morti formano placche
diluizioni 1:10 del fago
VIRUS LITICI
numero placche =numero virioni infettivi
colorante colora le cellule vive
varie piastre con varie diluizioni 1:10
placche=zone circolari di cellule morte
titolo virale = unità virale/ml
titolo di particelle infettive
titolo di particelle fisiche
titolo di particelle infettive
completamento ciclo litico
ospite adeguato