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Imunofluorescência - Coggle Diagram
Imunofluorescência
Imunofluorescência Indireta (Secundária)
Detecção de anticorpos usando uma anti-imunoglobulina marcado com fluorocromo
Maior sensibilidade
Ex.: FTA-ABS (sífilis)
Antígeno (Kit) → anticorpo primário antígeno-específico (amostra) → anticorpo secundário anti-imunoglobulina marcado com fluorocromo (Kit)
Imunofluorescência Direta (Primária)
Detecção de antígenos diretamente de células e tecidos
Imunofenotipagem por citometria de fluxo (detector é diferente)
Antígeno (da amostra) → anticorpo primário marcado com fluorocromo
Imunofluorescência
Conjugado
Antígeno + fluorocromo
Anticorpo + fluorocromo
Exemplos de fluorocromos
Isotiocianato de fluoresceína (FITC)
Lisamina-rodamina B
Vermelho texas
Ficoeritrina (PE)
Microscópio de Fluorescência
Fonte de luz → filtro de excitação → espelho dicroico → objetiva → amostra → excita o fluorocromo do conjugado, que vai emitir luz → luz para para a objetiva → espelho dicroico → filtro de emissão → ocular → detector