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Técnicas biotecnológicas-genéticas parar el tratamiento de enfermedades,…
Técnicas biotecnológicas-genéticas parar el tratamiento de enfermedades
Terapia génica
Adición génica
Inserción de genes a una célula
Vectores
Técnicas
In-vitro
Ex-vitro
Edición génica
Alteración
Gen defectuoso
Inactivación
Gen defectuoso
Ruptura de ADN
A través de enzimas
No expresamiento del gen defectuoso
Vectores
No virales
Electroporación
Poros en la membrana celular
Paso de genes al interior
Virales
Lentivirales
Retrovirus
Células madre
Células sin capacidad de divisón
Adenovirales
Reacciones inmunes fuertes
Capacidad de empacatamiento
Adeno-asociados
Parvovirus
Vector más utilizado
Sin asociaciones patológicas
Riesgos
Reacción inmune
Mutagénesis
Inactivación involuntaria
Proteínas recombinantes
Selección de la cepa de producción
baja tasa de mutación
Baja tasa de inserción de secuencias provenientes del plásmido
Las bacterias Gram–positivas como Bacillus subtilis y Bacillus megaterium también se han usado para la producción de PR.
E. coli K–12 y E. coli B
Cultivo bacteriano
Medio de cultivo
carbono, nitrógeno, fósforo, azufre, potasio, y magnesio.
Mb, Co, Ni, Fe, Ca, Cu, Mn
amortiguador de pH
Transferencia de oxígeno al biorreactor
Velocidad en el suministro de oxígeno al menos igual que la velocidad de consumo
Modo de operación y sobreflujo metabólico
Heterogeneidades ambientales
Cantidades óptimas de CO2
pH adecuado
Sustrato adecuado
Purificación de PR
Homogeneización a alta presión
Vectores de expresión
Plásmidos de alto número de copias
500 por célula
Cantidad de PR producida será mayor
Alta carga metabólica para la célula
