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Laboratorio de microbiología: conocimientos básicos para un clínico -…
Laboratorio de microbiología: conocimientos básicos para un clínico
Etapa pre- analítica
Manual de toma de muestras
tipo de muestra
forma de recolección
condiciones de transporte
conservación
políticas del lab
Muestras enviadas al lab
período donde hay mayor excreción del agente infeccioso
del sitio especifico de la infección
evitar contaminación
sistemas de recolección estériles
evitar torundas o hisopos de Dracon ( rayon o algodón)
Recomendable usar torundas flocadas
antes de cualquier tratamiento antimicrobiano
Condiciones de transporte
muestras rotuladas con info completa
Incluir datos del paciente ( antecedentes, diagnóstico, sitio especifico de muestra, administración de tratamiento, datos de médico tratante e omndocar si el patógeno es peligroso
Etapa analítica
Diagnóstico microbiólogico directo
Obersavación directa
examinación microscópica ( bacterias, hongos, parasitos y virus)
microscopía directa al fresco: con o sin tinciones
Tinciones: reconocer características morfológicas y agrupación
Ej: Tinción de Gram ( Gram negativo o positivo)
Cultivo de la muestra
Incubación en cultivo artificial
medios líquidos, caldos o solidificados con agar
Tipos: medios enriquecidos, selectivos, diferenciales y especializados
cultivo microbiano requiere de más tiempo
18 a 48 hrs - en bacterias
hasta semanas o meses - micobacterias y hongos filamentosos
frecuentemente se realizan subcultivos
Identificación de organismo aislado
metodologías
macroscopicamente
microscopicamente
comportamiento metabólico y bioquímico
pruebas manuales o automatizadas
requerimiento nutricional
diagnósticas no tradicionales
Diagnóstico directo no tradicional
Métodos inmunológicos
Enzimoinmunoensayo (EIA)
detectar antígenos directo de muestra
el mas utilizado es ELISA
Inmunocromatografía
detectar antígenos directo de muestra
reactivo detector y reactivo de captura se encuentran
Aglutinación con particular de látex
unión de partículas inertes de látex a un antígeno
mediante fuerzas eléctricas intramoleculares o uniones covalentes
Inmunofluorescencia
detectar antígenos directo de muestra
Modalidad Direct Fluorescente Antibody, DFA
Modalidad Indirect Fluorescente Antibody, IFA
Métodos basados en ácido nucleico
permite el estudio de resistencia bacteriana y epidemiología molecular
Técnica: Reacción de Polimerasa en Cadena ( RPC)
Identificación de bacterias a través de comparación de secuencias ya conocidas en bases de datos
Técnica más utilizada: secuenciación del ARN ribosomal 16S
Espectometría de masa
rápida detección
microorganismo desde cultiuvo
análisis de proteínas y comparación con base de datos
identificar género y especie
Susceptibilidad antimicrobiana
Difusión con disco
info cualitativa de sensibilidad
se crea un "halo de inhibición)
18hrs de incubación
Epsilometría o E-test
info cuantitativa de sensibilidad
determina CIM
produce inhibición de crecimiento bacteriano
Dilución
estándar de oro
info cuantitativa determinando CIM
incubación por 18hrs
Diagnóstico microbiólogico indirecto
detección indirecta de patógeno a través de anticuerpos específicos
Técnicas + utilizadas: ELISA, inmunofluorescencia indirecta y floculación
Diferencia infección primaria de reinfección o infección crónica
Etapa post- analítica
Resultados obtenidos son transferidos al sistema informático
Informe final para el personal de salud
Se respeta la confidencialidad del paciente