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Cromatografía de Capa Fina Identidad de Cafeína, image, image, image,…
Cromatografía de Capa Fina
Identidad de Cafeína
REACTIVOS Y SOLUCIONES
Cloroformo grado cromatográfico o espectral
Metanol grado cromatográfico o espectral
Agua destilada
Estándar de referencia Cafeína pureza entre 98-101% grado analítico
Muestra de cafeína y/o forma farmacéutica que la contenga: tabletas,
capsulas, supositorios, jarabes o soluciones como Red Bull, café, té negro.
MATERIALES
Placas de alumínio Sílica Gel 60, UV 524
Pipetas capilares dosificadoras de 1, 3 y 5 µL
Pipetas graduadas de 2,5,10 ml
Vasos de precipitados de 50
Matraz volumétrico de 50 ml
Vidrio de reloj como tapa para el vaso de precipitados
Mortero con pistilo chico y perfectamente limpio
Microcapilares de vidrio de 1, 3 y 5 µl
Lápiz
Regla de 20 cm
Cutter
Tijeras
Tabla de cortar
Cristalizador chico para baño María
Parrilla eléctrica
Guantes de cirujano CH, MED y GDE
Papel filtro porosidad media Whatman #41 cuadro o circulo de 10 x 10 cm
Balanza analítica calibrada y en servicio
Filtros Millex tipo pirinola
Jeringa hipodérmica de 10 ml
Parafilm
PROCEDIEMIENTO
Preparación de la Fase Móvil Cloroformo/Metanol/Agua (180:15:1):
Utilice una pipeta graduada para medir 18 ml de cloroformo en un vaso de precipitados de 50 ml.
Mida 1.5 ml de metanol y agréguelo al mismo vaso.
Agregue 0.1 ml de agua destilada al vaso.
Mezcle bien la solución.
Tape el vaso con parafilm y coloque un vidrio de reloj encima para cubrirlo.
Identifique la Fase Móvil (FM).
Preparación de la Placa:
Use guantes y corte la placa de aluminio o vidrio al tamaño deseado, generalmente 10 x 10 cm.
Con un lápiz y una regla, marque una línea base a unos 1 cm de la base de la placa.
Marque la ubicación de las muestras y el estándar a lo largo de la línea base, asegurándose de que estén separados y etiquetados correctamente.
Preparación del Estándar y Muestras:
Pese 50 mg ± 5 mg de estándar de Cafeína y transfiéralo a un matraz volumétrico de 50 ml.
Agregue metanol y disuelva completamente, luego complete el volumen con metanol para obtener una concentración aproximada de 1 mg/ml.
Para tabletas o cápsulas:
Triture 5 tabletas o cápsulas y pese 50 mg ± 5 mg de muestra de Cafeína.
Transfiera la muestra a un matraz volumétrico de 50 ml y disuélvala en metanol.
Filtre 5 ml con Millex en un vaso de precipitados de 30 ml, desechando los primeros 3 ml.
Para supositorios:
Pique finamente 5 supositorios sobre una tabla de cortar limpia.
Pese 20 mg ± 5 mg en un vaso de precipitados de 50 ml y agregue 20 ml de metanol.
Caliente a baño María para disolver, luego filtre 5 ml con Millex en un vaso de precipitados de 30 ml, desechando los primeros 3 ml
Para jarabes o soluciones:
Tome una alícuota de la solución según la concentración indicada en la etiqueta del medicamento y dilúyala con metanol hasta una concentración aproximada de 1 mg/ml.
Identifique adecuadamente el estándar y las muestras.
La Cromatografía de Capa Fina (TLC por sus siglas en inglés, Thin-Layer Chromatography) es una técnica analítica utilizada en química para separar y analizar mezclas de sustancias. En este método, una fase estacionaria, generalmente una capa delgada de material absorbente como sílice gel o alúmina, se aplica sobre una superficie plana, como una placa de vidrio o aluminio.
