Cloroformo grado cromatográfico o espectral

 Estándar de referencia Cafeína pureza entre 98-101% grado analítico

 Muestra de cafeína y/o forma farmacéutica que la contenga: tabletas,

capsulas, supositorios, jarabes o soluciones como Red Bull, café, té negro.

 Pipetas capilares dosificadoras de 1, 3 y 5 µL

 Vidrio de reloj como tapa para el vaso de precipitados

 Mortero con pistilo chico y perfectamente limpio

 Papel filtro porosidad media Whatman #41 cuadro o circulo de 10 x 10 cm

Utilice una pipeta graduada para medir 18 ml de cloroformo en un vaso de precipitados de 50 ml.

Mida 1.5 ml de metanol y agréguelo al mismo vaso.

Tape el vaso con parafilm y coloque un vidrio de reloj encima para cubrirlo.

Use guantes y corte la placa de aluminio o vidrio al tamaño deseado, generalmente 10 x 10 cm.

Con un lápiz y una regla, marque una línea base a unos 1 cm de la base de la placa.

Marque la ubicación de las muestras y el estándar a lo largo de la línea base, asegurándose de que estén separados y etiquetados correctamente.

Pese 50 mg ± 5 mg de estándar de Cafeína y transfiéralo a un matraz volumétrico de 50 ml.

Agregue metanol y disuelva completamente, luego complete el volumen con metanol para obtener una concentración aproximada de 1 mg/ml.

Triture 5 tabletas o cápsulas y pese 50 mg ± 5 mg de muestra de Cafeína.

Transfiera la muestra a un matraz volumétrico de 50 ml y disuélvala en metanol.

Filtre 5 ml con Millex en un vaso de precipitados de 30 ml, desechando los primeros 3 ml.

Pique finamente 5 supositorios sobre una tabla de cortar limpia.

Pese 20 mg ± 5 mg en un vaso de precipitados de 50 ml y agregue 20 ml de metanol.

Caliente a baño María para disolver, luego filtre 5 ml con Millex en un vaso de precipitados de 30 ml, desechando los primeros 3 ml

Tome una alícuota de la solución según la concentración indicada en la etiqueta del medicamento y dilúyala con metanol hasta una concentración aproximada de 1 mg/ml.

Identifique adecuadamente el estándar y las muestras.

La Cromatografía de Capa Fina (TLC por sus siglas en inglés, Thin-Layer Chromatography) es una técnica analítica utilizada en química para separar y analizar mezclas de sustancias. En este método, una fase estacionaria, generalmente una capa delgada de material absorbente como sílice gel o alúmina, se aplica sobre una superficie plana, como una placa de vidrio o aluminio.