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TECNICHE DI LABORATORIO - Coggle Diagram
TECNICHE DI LABORATORIO
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TEST DI AGGLUTINAZIONE
SONO REALIZZATI RIVESTENDO SFERE DI LATTICE (LATTICE SENSIBILIZZATO) CON LO SCOPO DI RENDERE CHIARAMENTE VISIBILE IL FENOMENO DELL'AGGLUTINAZIONE,
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NEL 1° CASO SI OTTERRÀ UN TEST IN GRADO DI EVIDENZIARE LA PRESENZA DI ANTICORPI DIRETTI CONTRO UNO SPECIFICO ANTIGENE NEL SIERO DEL PAZIENTE.
IL TEST DI AGGLUTINAZIONE AL LATTICE È UTILIZZATO PER L'IDENTIFICAZIONE E LA TIPIZZAZIONE DI MOLTI MICRORGANISMI.
NEL 2° CASO, IL TEST MIRA ALL'IDENTIFICAZIONE DELLA SPECIE BATTERICA O VIRALE ALL'INTERNO DELLO STESSO.
WESTERN BLOT
SUCCESSIVAMENTE LE PROTEINE VENGONO TRASFERITE SU UN SUPPORTO, UNA MEMBRANA DI NITROCELLULOSA, CON SUCCESSIVA ELETTROFORESI,
E QUINDI SI PROCEDE AL RICONOSCIMENTO VERO E PROPRIO DELLA PROTEINA MEDIANTE L'UTILIZZO DI UN ANTICORPO SPECIFICO.
LE PROTEINE POSSO QUINDI ESSERE COLORATE PER LA VISUALIZZAZIONE ED IDENTIFICAZIONE MEDIANTE SEQUENZIAMENTO N-TERMINALE, SPETTROMETRIA DI MASSA O IMMUNORILEVAZIONE.
LA MISCELA DI PROTEINE VIENE PRIMA SEPARATA IN BASE ALLE LORO DIMENSIONI (O PESO MOLECOLARE), UTILIZZANDO UN GEL DI POLIACRILAMMIDE
E' UNA TECNICA BIOCHIMICA CHE PERMETTE L'IDENTIFICAZIONE DI UNA DETERMINATA PROTEINA IN UNA MISCELA DI PROTEINE, MEDIANTE IL RICONOSCIMENTO CON ANTICORPI SPECIFICI
IMMUNODIFFUSIONE RADIALE
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E' UNA TECNICA X LA DETERMINAZIONE QUANTITATIVA DI UN ANTIGENE: QUESTO VIENE POSTO A DIFFONDERE IN UN GEL CONTENENTE IL CORRISPONDENTE ANTICORPO
TEST DI COMBS
QUANDO UNA PERSONA PRODUCE ANTICORPI CONTRO I PROPRI GLOBULI ROSSI, COME NELLE MALATTIE AUTOIMMUNI, I GLOBULI ROSSI POSSONO AGGLUTINARSI SPONTANEAMENTE (AUTOAGGLUTINAZIONE).
SI TRATTA DI UN TEST DI EMOAGGLUTINAZIONE IN VITRO E SI DISTINGUE IN DIRETTO ED INDIRETTO,
REAZIONE IMMUNOLOGICA TRA ANTIGENE E ANTICORPO SPECIFICO CHE PROVOCA LA FORMAZIONE DI AGGLOMERATI DI ANTIGENE CHE PRECIPITANO.
TEST DI COOMBS INDIRETTO RILEVA EVENTUALI ANTICORPI ANTI-ERITROCITARI CIRCOLANTI NEL SANGUE, SVINCOLATI DAL LEGAME CON LE EMAZIE E DIRETTI CONTRO I GLOBULI ROSSI.
IL SIERO DI COOMBS VIENE AGGIUNTO AL CAMPIONE EMATICO IN UN SECONDO MOMENTO, DOPO AVER CIMENTATO IL SIERO DEL PAZIENTE RICEVENTE CON GLI ANTICORPI DEL DONATORE CONTRO CUI SI VUOLE RICERCARE LA PRESENZA DI ANTICORPI.
NEL CASO SIANO PRESENTI ANTICORPI ANTI-ERITROCITARI NEL SIERO CIMENTATO CON I GLOBULI ROSSI, SI VENGONO A FORMARE COMPLESSI ANTIGENE-ANTICORPI SULLE MEMBRANE DEGLI ERITROCITI CHE,
LEGATI A LORO VOLTA DAGLI ANTICORPI DEL SIERO DI COOMBS, DETERMINANO AGGLUTINAZIONE (TEST DI COOMBS INDIRETTO POSITIVO).
IL TEST DI COOMBS INDIRETTO È NEGATIVO QUANDO NON VI È NESSUNA REAZIONE TRA GLI ANTICORPI DEL SIERO E GLI ANTIGENI DEI GLOBULI ROSSI. VIENE UTILIZZATO NELLA RICERCA DI COMPATIBILITÀ DONATORE/RICEVENTE
TEST DI COMBS DIRETTO PERMETTE DI INDIVIDUARE AUTOANTICORPI DETTI AUTO-AB O FRAZIONI DEL COMPLEMENTO, ADESI ALLA SUPERFICIE DEI GLOBULI ROSSI.
VIENE ESEGUITO CIMENTANDO IL SANGUE INTERO RACCOLTO CON IL SIERO DI COOMBS, UN SIERO DI CONIGLIO CON AB ANTI-AUTOANTICORPI.
IL TEST È POSITIVO SE GLI ANTICORPI PRESENTI NEL SIERO DI COOMBS CREANO DEI LEGAMI A PONTE RESPONSABILI DELL'AGGLUTINAZIONE DEI GLOBULI ROSSI E FORMAZIONE DI PRECIPITATO.
IL TEST È NEGATIVO SE IL CAMPIONE RISULTA INALTERATO. VIENE UTILIZZATO NELLA DIAGNOSI DI MALATTIE EMOLITICHE AUTOIMMUNI, NELLA MALATTIA EMOLITICA DEL NEONATO E NELLE REAZIONI
È IMPORTANTE PER RICONOSCERE ED EVITARE PERICOLOSE REAZIONI AVVERSE, CHE POSSONO PORTARE ALLA MORTE,
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IL TEST DI COOMBS, DETTO ANCHE TEST DELL'ANTIGLOBULINA, È UN ESAME EMATOCHIMICO
CHE PERMETTE DI RILEVARE LA PRESENZA DI SPECIFICI ANTICORPI - DETTI ANTIGENI ANTI RH - SULLA SUPERFICIE DEI GLOBULI ROSSI OPPURE LIBERI NEL SIERO,
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