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TECNICHE DI IMMUNOLOGIA - Coggle Diagram
TECNICHE DI IMMUNOLOGIA
INTRO
L'AZIONE DEGLI AUTOANTICORPI SCATENA DELLE RISPOSTE INFIAMMATORIE INAPPROPRIATE, CON CONSEGUENTE DANNEGGIAMENTO E/O DISFUNZIONE D'ORGANO O SISTEMICA
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NE ABBIAMO DI 2 SPECIE:
AUTOANTICORPI ORGANO SPECIFICI: ORGANO BERSAGLIO, QUINDI CON ALTERAZIONE DELLA FUNZIONE D'ORGANO
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AUTOANTICORPI NON ORGANO SPECIFICI: SINTOMI COMUNI A DIVERSE PATOLOGIE, ANTICORPI DIRETTI VERSO STRUTTURE UBIQUITARIE
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ESSI VENGONO PRODOTTI NEL CASO IN CUI IL MECCANISMO DI DISCRIMINAZIONE TRA ELEMENTI SELF E NON-SELF CESSI DI FUNZIONARE CORRETTAMENTE,
ALCUNI AUTOANTICORPI POSSONO NON ESSERE DIRETTAMENTE SPECIFICI CONTRO UN TESSUTO, MA ESSERE PARTE DI UNA COMPLESSA RISPOSTA IMMUNITARIA INAPPROPRIATA
GLI AUTOANTICORPI SONO ANTICORPI IN GRADO DI RICONOSCERE E REAGIRE ERRONEAMENTE CON TESSUTI O ORGANI DELL'ORGANISMO DI APPARTENENZA (SELF)
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IMMUNOISTOCHIMICA
POSSIAMO AVERE:
IMMUNOFLUORESCENZA DIRETTA: VENGONO MESSI A CONTATTO COL TESSUTO I PRESUNTI ANTICORPI SPECIFICI MARCATI CON FLUORESCEINA
DOPO UN PERIODO DI INCUBAZIONE, SE AL MICROSCOPIO VENGONO VISUALIZZATI CORPUSCOLI FLUORESCENTI, SIGNIFICA CHE L'ANTISIERO E' SPECIFICO X QUELL'ANTIGENE
QUESTA TECNICA NON PERMETTE LA RICERCA DEGLI ANTICORPI IN UN SIERO PRELEVATO DA UN SOGGETTO, X QUESTO VIENE UTILIZZATO IL METODO INDIRETTO
IMMUNOFLUORESCENZA INDIRETTA. IN QUESTA TECNICA SI METTE IL SIERO IN ESAME A CONTATTO CON ANTIGENI NOTI FISSATI AL VETRINO, SI FORMERA' L'EVENTUALE IMMUNO-COMPLESSO PRIMARIO
QUINDI VA AGGIUNTO UN ANTI-SIERO ANTI-IMMUNOGLOBULINE SPECIFICO, MARCATO CON FLUORESCEINA
SE NEL PREPARATO SONO RIMASTI ANTICORPI DOPO IL 1° LAVAGGIO SI AVRA' LA FORMAZIONE DI UN IMMUNO-COMPLESSO SECONDARIO, E QUINDI L'ESISTO SARA' POSITIVO
FASI:
INCUBAZIONE DEL SIERO, OPPORTUNAMENTE DILUITO SU UN SUBSTRATO RICCO DELLANTIGENE BERSAGLIO
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AL MICROSCOPIO, I COMPLESSI ANTIGENE-ANTICORPO APPAIONO COLORATE IN VERDE
IMMUNOFLUORESCENZA UTILIZZA COME MARCATORE UN FLUOROCROMO CHE E' UN COLORANTE: ASSORBENDO ONDE AD ALTA FREQUENZA (ULTRAVIOLETTI), EMETTE LUCE NEL CAMPO VISIBILE.
IL FLUOROCROMO + IMPIEGATO E' L'ISOTIOCIANATO DI FLUORESCEINA CHE ASSORBENDO RAGGI UV, EMETTE LUCE VERDE
PUO' ESSERE:
DIRETTA: SI UTILIZZA UN UNICO ANTICORPO DIRETTO CONTRO LA MOLECOLA DA RICERCARE E QUESTO STESSO ANTICORPO LEGA UNA SOSTANZA MARCANTE, COLORATA, CHE NE PERMETTE LA VISUALIZZAZIONE
INDIRETTA: SI UTILIZZANO 2 ANTICORPI, IL 1° DIRETTO CONTRO LA MOLECOLA DA RICERCARE E IL 2° CONIUGATO CON LA SOSTANZA MARCANTE CHE ANDRA' A LEGARSI AL 1° ANTICORPO
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E' UNA METODICA CHE EVIDENZIA DETERMINATE SOSTANZE IN UN TESSUTO TRAMITE L'UTILIZZO DI REAZIONI ANTIGENE-ANTICORPO
ANDANDO AD EVIDENZIARE DOVE QUESTO COMPLESSO VIENE A FORMARSI, ATTRAVERSO VARI METODI
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