Já o álcool-acetona, nas G+, penetra na parede celular, reduzindo a camada de peptideoglicano. Nas G-, penetra na parede celular, degradando a membrana externa e reduzindo a camada de peptideoglicano. Com isso, o cristal violeta e o lugol permanece no interior das células das G+, enquanto nas G-, o cristal violeta e o lugol acabam saindo da célula