Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

DIAGNOSI VIROLOGICA lezione 9 13 marzo 2024 + lezione 10 18 Marzo 2024…

- - - - lo scopo della virologia NON è solo la diagnosi
        è utile pure per capire le seguenti cose:
        
        PREGRESSA INFEZIONE
        
        la presenza di un'infezione latente implica la possibilità di riattivazione
        
        VALUTAZIONE dell'EFFICACIA della TERAPIA
        
        SCOPO EPIDEMIOLOGICO
        
        VALUTAZIONE dello STATO VACCINALE
- - - - RICERCA degli ANTIGENI
        
        esempio 1
        quantificazione della pp65 antigenemua di HCMV
        sogg con infezione da citomelica
        è stata fatto un esame ccon ommunofluorescenza
        
        esempio 2
        antigeni virali intracellulari
        l'immunofluuorenscenza permette di vedere che gli antigeni virali sono concnetrati all'interno del nucleo
        
        esmpio 3
        virus del morbillo
        gli antigeni soono tutti concentrati nel citoplasma
        +
        infatti il morbillo è un virus a RNA a filamento pos che NON ha nessuna relazione ocn il nucleo
        
        esempio 4
        herpes simplex
        vescicole mucocutanee
        è possibile verificare se quella vescicola sia il frutto della citopatia dell'herpes simples
        
        reazione di agglutinazione passiva
        antigene solubile + anticorpo
        = reaz di precipitazione
        
        l'anticorpo viene legato a delle particelle di lattice
        
        quando l'antiegne virale reagisce con gli anticorpi
        
        l'antigene virale si lega alle particell di lattice
        
        così è possbile identificarlo
        
        1 more item...
        
        reaz di immunofluorescenza indiretta per l'identificszione del virus del morbillo in coltura cellulare
      - RICERCA del GENOMA VIRALE
        
        reaz polimerasica a catena
        
        PCR real time
        oermettono di capire cosa succede nello svolgersi della reaz
        
        METODICA QUANTITATIVA
        
        GENOTIPIZZAZIONE
        alcuni virus predenta una alata variaabilità genetica
        alcune variabili genetici si sono stabilizzate particolarmente nella popolazine fino a creare dei veri e propri genotipi che presentano una prevalenza inalcune aree geografiche
        
        genotipo ??
        sono i più comuni
        
        ome identificare un genotipo ?
        
        si fa una reaz di ibridazione
        
        di fa un lavaggio
        
        si utilizzano delle sonde legate a biotina specifiche per un genotipo
        
        la sonda si lega grazie ad una reaz specifica
        
        test di genotipizzazione per HIV
        è possibile usarlo per:
        
        individuare geni di farmaco resistenza
        
        antigeni ??
      - OSSERVAZIONE MICROSCOPICA
      - ISOLAMENTO in VITRO
  - - - DIAGNOSI di PRIMO LIVELLO
        diagnosi che permette di vedere quali anticorpi ha sviluppato il pz
        a volte infatti trovare detemrinati anticorpi è sufficiente per effettuare diagnosi
        
        DIAGNOSI di SECONDO LIVELLO
        sono diagnosi di 2 livello ad esempio:
        
        sapere quanto genoma virale c'è
        
        profilo genetico
        
        efficacia della terapia
        
        ricerca degli antigeni
      - RICERCA degli ANTICORPI
        
        DETERMINAZIONE dello
        STATO IMMUNITARIO
        è utile ricercare le IgG per valutare l'efficacia di un vaccino precedentemente effettuata
        
        TEST QUANTITATIVO
        per potere dure che un sogg ha risposte bene ad un vaccino è necessario effettuare un test quantittavio
        ovvero il sogg deve avere un numero d anticorpi magg a ????
        
        slide con CURVA di RIFERIMENTO per il calcolo dlle unità
        
        DIAGNOSI DI INFEZIONE RECENTE
        = ricerca delle IgM
        
        tuttavia siamo sicuri di potere cercare IgM di tutte le infezioni?
        NO
        
        esempio 1
        infatti NON esiste un test che permette di valutare la presenza di IgM anti HCV
        allora in questo per valutare lo stato di infezione èpossibile ricercare il genoma
        
        le IgM prodotte incorso di infezione da HCV NON sono infatti sufficienti per potere essere ricercate
        
        esmepio 2
        HIV
        in questo caso invece la presenza di anticorpi detemirna per certo aèresenza di infezione da HIV
        
        come faccio a spare quanto tempo fa è avvenuta l'infezione?
        
        è possibile effettuare la ricerca di p24
        
        la quale ha una particolare cinetica (ovvero viene rilascista in circolo nelle fasi inizialei dell'infezione, coe se fosse una IgM)
        
        successivamente scompare
        
        e poi ricompare di nuovo quando insorge la AIDS
        
        quindi l'antiegene p24 ha lostesso siginifcato delle IgM
        
        ⚠️
        controllare sempre se il risultato della diagnosi sia inerente al paziente
        ad esmepio se ho un pazuente immunocompromesso NON posso chiedere un test di ricerca degli anticorpi perche se venisse negativo NON avrebbe alcun significato
      - CONFRONTO
        
        è importante considerare che ogni test presenta i propri parametri
        infatti lo stesso test fatto in due laboratori diversie con metologie diverse hanno parametri completamente diversi
        
        esmepio
        ad esmepio se un paz inizialemnte ha pochi Ig e poi ne ha tanti Ig
        è un segnale di infezione SOLO SE entrambi i test sono stati fatti nello STESSO laboratorio
        
        è SEMPRE NECESSARIO verificare la diagnosi data da una macchina
        bisogna infatti controllare clinicamente che il paziente presenti i sintomi corrispondenti ai dati dal laboratorio clinico
        possono capitare infatti:
        
        scambio di provetta
        
        oppure smepilicemnte il test NON è specifico
        (ci son oinfatti molti fattori che possano interferire con la specificità di un esame)
      - UTILITA'
        
        vedi SLIDE
      - QUANDO NON SI PU FARE?
        
        infezione localizzata
        
        HPV (papillomavirus)
        
        virus influenzali
        che cambiamno ogni anno
- - - - vedi SLIDE
      - inizialmente è necessario fare un prelievo di sangue
        
        il virus è presente nel sangue soltanto per un breve periodo
        
        dopo la scomparsa del virus dal sangue si avvia però la produzione di Ig
        
        RISPOSTA ANTICORPALE
        
        virus epatite A NON cresce bene in vitro = ovvero non da effetto citopatico
        
        la diagnosi che is basa sulla ricerca degli Ig è assolutamente valida
        
        IgM
        = infezione molto recente
        
        IgG
        = infezione più vecchia
        
        MICROSCOPIA ELETTRONICA
        si effettua questo esame perchè nel cao dei vurus l'osservazione morfologica coincide con l'uso del microscopio elettronico
        
        TUTTAVIA
        NON è una pratica molto usata per via di:
        
        elevati costi
        
        ISOLAMENTO IN VITRO
        limiti
        
        impiega tatnto tempo
        
        è necessario avere colture cellulari per molti virus
        
        incapacità o difficol
        tà di alcuni virus a replicarsi
        = NON dando effetto ditopatico che è l'espressione visibile della patogenicità
        
        COLTURA VIRALE
        
        ai fini diagnostici NON è perfettamente performante