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impronta genetica - Coggle Diagram

- - - - esaminando STR diverse si possono riconoscere combinazioni che caratterizzano quell’individuo
  - - - oggi però con la PCR è possibile amplificare direttamente la sequenza di interesse
- - - - è una collezione di cloni contenenti un frammento di DNA genomico
    - - nei cromosomi eucarioti i geni sono spesso spezzettati in esoni inframmezzati da sequenze non codificanti (introni) il DNA genomico non è il materiale di partenza ideale per isolare un gene
        
        cDNA deriva dall’inglese complementary DNA a indicare che uno dei ffilamenti di DNA ha la sequenza complementare al filamento dell’mRNA da cui deriva
      - per costruire una libreria di cDNA bisogna isolare gli mRNA di una cellula e convertirli nelle loro copie a DNA.
        Questo passaggio è possibile grazie ad un enzima trascritta di inversa (DNA polimerasi particolare in grado di usare un filamento di RNA come stampo per generare una copia a DNA)
        
        il passo successivo è clonare il cDNA da avarrr un gran numero di copie
      - per isolare un cDNA tra le migliaia di può sfruttare le proprietà del DNA detta ibridazione (proprietà di legarsi a un filamento con sequenza complementare)
        
        il prerequisito è la conoscenza della sequenza nucleotidica di una piccola porzione del gene di nostro interesse
        
        ottenibile in diversi modi
        
        si può applicare a ritroso il codice genetico a partire dalla sequenza di amminoacidi
        
        sfruttare l’analisi comparativa delle sequenze dello stesso gene
        
        è possibile sintetizzare chimicamente un oligonucleotide creando così una sonda a DNA
        
        le sospensioni contenenti le cellule batteriche vengono diluite e seminate su un terreno solido in piastre Petri.In questo modo le singole cellule si separano le une dalle altre e dividendosi producono delle colonie formate tutte da cloni
        
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