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PCR - Coggle Diagram
PCR
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Pasos a seguir
Extracción de ADN: Se extrae el ADN de la muestra que se quiere analizar. Esta muestra puede ser de diferentes fuentes, como células, tejidos, fluidos corporales, etc.
Desnaturalización: El ADN extraído se calienta a una temperatura alta (alrededor de 94-98°C), lo que rompe los puentes de hidrógeno entre las dos cadenas complementarias, separando así las hebras de ADN y dando lugar a dos hebras simples.
Alineamiento de cebadores: Se añaden cebadores al ADN desnaturalizado. Los cebadores son pequeños fragmentos de ADN diseñados específicamente para emparejarse con secuencias de ADN específicas en el punto donde se quiere iniciar la amplificación.
Hibridación: Los cebadores se unen a las secuencias de ADN complementarias en las hebras simples, marcando así el inicio y el final de la región que se quiere amplificar.
Extensión y amplificación: Se añade una enzima llamada ADN polimerasa, que inicia la síntesis de nuevas hebras de ADN utilizando los cebadores como punto de partida. La temperatura se reduce para permitir que la ADN polimerasa funcione óptimamente. Esta enzima sintetiza nuevas cadenas de ADN complementarias a partir de las hebras originales, utilizando los nucleótidos presentes en la solución de reacción.
Ciclaje térmico: El proceso de desnaturalización, alineamiento de cebadores, hibridación y extensión se repite varias veces (normalmente entre 20 y 40 ciclos) en un ciclo térmico automatizado que ajusta la temperatura para cada etapa del proceso.
Análisis de resultados: Después de completar los ciclos de amplificación, se puede analizar el ADN amplificado utilizando diferentes métodos, como electroforesis en gel o secuenciación de ADN, para determinar la presencia, la cantidad y las características del fragmento amplificado.
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