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MALATTIE MICROBICHE DI ORIGINE ALIMENTARE 3 - Coggle Diagram
MALATTIE MICROBICHE DI ORIGINE ALIMENTARE 3
PRINCIPI E TECNICHE DI STERILIZZAZIONE
TIPI DI STERILIZZAZIONE
STERILIZZAZIONE CON CALORE SECCO, FORNO PASTEUR E SI UTILIZZA ARIA FORTEMENTE RISCALDATA (160-180 °C)
STERILIZZAZIONE MEDIANTE CALORE, CON FIAMMA DIRETTA (BECCO BUNSEN) O BOLLITURA (TEMPERATURA 100°C)
STERILIZZAZIONE CON CALORE UMICO, UTILIZZA IL CALORE DEL VAPORE D'ACQUA SOTTOPRESSIONE CHE RAGGIUNGE TEMPERATURE SUPERIORI I 100°C, TRAMITE LO STRUMENTO AUTOCLAVE
LA STERILIZZAZIONE TRAMITE L'AUTOCLAVE UTILIZZA 15-30 MIN A TEMPERATURE D 121° E PRESSIONE DI 1 ATM
ATTRAVERSO RADIAZIONI
UV (LAMPADE GERMICIDE) CHE UTILIZZANO RAGGI ULTRAVIOLETTI CHE DETERMINANO ROTTURE E MUTAZIONI DI ACIDI NUCLEICI
RADIAZIONI IONIZZANTI (RAGGI GAMMA) DETERMINANO ANCH'ESSI LE ROTTURE E LE MUTAZIONI NEGLI ACIDI NUCLEICI ATTRAVERSO RADICALI DELL'OSSIGENO CHE SI PRODUCONO CON LA SCISSIONE DELL'ACQUA
SOSTANZE CHIMICHE, UTILIZZIAMO L'OSSIDO DI ETILENE, BLOCCA LE ATTIVITA' ENZIMATICHE E VIENE IMPIEGANO X GLI STRUMENTI CHE NON SOPPORTANO L'ESPOSIZIONE AD ELEVATE TEMPERATURE
FILTRAZIONE, MEZZO DI STERILIZZAZIONE TRAMITE L'UTILIZZO DI MEMBRANE FILTRO CHE SONO COSTITUITE DA ELEMENTI DI CARTA SOTTILE (CELLULOSA O ALTRI POLIMERI)
CHE RIESCONO A TRATTENERE DALLE BIOMOLECOLE + GRANDI, FINO AI VIRUS + PICCOLI
LA STERILIZZAZIONE E' UN PROCEDIMENTO FISICO E CHIMICO CHE HA COME OBIETTIVO LA DISTRUZIONE DI OGNI MICRORGANISMO VIVENTE
CAPPA A FLUSSO LAMINARE
LE CAPPE A FLUSSO LAMINARE SI DIVIDONO IN 2 TIPOLOGIE:
VERTICALE E ORIZZONTALE
LA STERILIZZAZIONE DELL'ARIA ALL'INTERNO DELLA CAPPA
VIENE OTTENUTA ATTRAVERSO L'UTILIZZO DEI FILTRI HEPA
RIDUCE INOLTRE LA POSSIBILITA' DI CONTAMINAZIONI CROCIATE
CONSENTENDO DI LAVORARE IN CONDIZIONI DI STERILITA'
LE CAPPE A FLUSSO LAMINARE VERTICALE SONO DOTATE DI 3 FILTRI HEPA,
UN VENTILATORE SUPERIORE SPINGE L'ARIA ATTRAVERSO UN FILTRO D'ARIA PRINCIPALE DA CUI EMERGE UN FLUSSO LAMINARE CHE INVESTE IL PIANO DI LAVORO.
E' UNA CAPPA UTILIZZATA IN AMBITO BIOLOGICO X PROTEGGERE L'OPERATORE E L'AMBIENTE CIRCOSTANTE
DA PARTE DI AGENTI BIOLOGICI, COME I MICRORGANISMI PATOGENI
L'ARIA OLTREPASSA IL PIANO DI LAVORO E VIENE ASPIRATA DA UN VENTILATORE INFERIORE.
SUCCESSIVAMENTE VIENE ESPINTA ATTRAVERSO UN SUCCESSORE FILTRO NELLO SPAZIO SOVRASTANTE IL FILTRO PRINCIPALE.
LA CAPPE HANNO UNO SCHERMO DI VETRO, ADOTTATO X UNA MAGGIORE SICUREZZA DELL'OPERATORE
DISTINGUIAMO 3 CLASSI IN BASE AL TIPO DI PROTEZIONE GARANTITA
ESAME MICROSCOPICO A FRESCO
HA UN UTILIZZO LIMITATO IN QUANTO LE CELLULE PRESENTANO UNA SCARSA SOPRAVVIVENZA, UN ECCESSIVO SPESSORE E SOPRATUTTTO UN ESIGUO CONTRASTO
NELL'ALLESTIRE IL CAMPIONE SI UTILIZZANO VETRINI PORTAOGGETTI SU CUI SI DEPOSITA UNA GOCCIA D'ACQUA
ALL'INTERNO DELLA QUALE SI PONE IL CAMPIONE RICOPERTO, AL TERMINE, DA UN VETRINO COPRIOGGETTO
CONSENTE DI OSSERVARE LE CELLULE VIVE, NON TRATTATE
TECNICHE DI ISOLAMENTO
SI DISTRIBUISCE UNIFORMEMENTE, STRISCIANDO, IL CAMPIONE SULLA SUPERFICIE DELL’AGAR MEDIANTE LA BACCHETTA STERILE.
COSI' DOPO L'INCUBAZIONE ALLA TEMPERATURA OTTIMALE DI CRESCITA,
TALI CELLULE DANNO ORIGINE OGNUNA A UNA MASSA CELLULARE VISIBILE AD OCCHIO NUDO (COLONIA)
TALE TECNICA RAPPRESENTA IL PASSAGGIO INIZIALE X COLTIVARE UNA SINGOLA SPECIE BATTERICA (COLTURA PURA)
PARTENDO DA UNA POPOLAZIONE MISTA
DILUENDO INFATTI OPPORTUNAMENTO UNA COLTURA LIBERA DI PARTENZA SU UNA PIASTRA CONTENETE TERRENO SOLIDO
SI OTTIENE LA SEPARAZIONE SPAZIALE DELLE SINGOLE CELLULE BATTERICHE AD ESSA CONTENUTE
MA E' ANCHE UTILE X AVERE UNA POPOLAZIONE DI PARTENZA OMOGENEA
QUANDO SI VUOLE CONDURRE UNO STUDIO BIOCHIMICO O FISIOLOGICO SU UNA DATA SPECIE
UN TERRENO SOLIDO PERMETTE UN'ISOLAMENTO DI UNA COLONIA SINGOLA
SISTEMI AUTOMATIZZATI
HANNO IL VANTAGGIO DI FORNIRE UNA SERIE DI TERRENI IN CUI SI EVIDENZIANO DIFFERENTI ATTIVITA' BIOCHIMICHE, IN UN UNICA SOLUZIONE, CHE POSSONO ESSERE INOCULATI TUTTI IN UNA VOLTA E LETTI IN UN TEMPO MOLTO BREVE (CIRCA 24 ORE)
NEL LABORATORIO DI MICROBIOLOGIA OGGI E' POSSIBILE EFFETTUARE L'IDENTIFICAZIONE DI BATTERI E LIEVITI
ATTRAVERSO SISTEMI AUTOMATICI E SEMI-AUTOMATICI FORNITE DA DIVERSE CASE PRODUTTRICI (ES. ROCHE, BIOMERIEUX, MINITEK ECC)
TECNICHE MOLECOLARI
X DIAGNOSTICA MOLECOLARE IN MICROBIOLOGIA CLINCIA SI INTENDE, IN SENSO STRETTO,
LA POSSIBILITA' DI IDENTIFICARE UN MICRORGANISMO IN BASE A 1 O + SEQUENZE GENICHE SPECIFICHE CON L'UTILIZZO DI TECNICHE DI AMPLIFICAZIONE MOLEOLARE COME LA PCR
TEST DI FISSAZIONE DEL COMPLEMENTO
IL CAMPIONE VIENE INCUBATO CON QUANTITA' NOTE DI COMPLEMENTO
E DI ANTIGENI CONTRO CUI E' DIRETTO L'ANTICORPO CHE STIAMO MISURANDO
IL GRADO DI FISSAZIONE DEL COMPLEMENTO INDICA LA QUANTITA' DI QUESTO ANTICORPO NEL CAMPIONE
MISURA L'ANTICORPO CHE CONSUMA IL COMPLEMENTO NEL SIERO CHE RICERCHIAMO