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PARETE CELLULARE BATTERICA 2 - Coggle Diagram
PARETE CELLULARE BATTERICA 2
COLORAZIONE DI ZIEHL-NEELSEN
OSSERVAZIONE MICROSCOPICA:
GLI ORGANISMI NON ACIDO RESISTENTI RISULTERANNO COLORATI IN BLU SCURO
GLI ORGANISMI ACIDO RESISTENTI (ES. MICOBATTERI) TRATTENGONO LA FUCSINA
ED APPAIONO COLORATI IN ROSSO SU DI UNO SFONDO BLU PALLIDO
TECNICA:
STEP 1: VERSARE LA FUCSINA FENICATA (FUCSINA BASICA IN ACQUA, ALCOOL E FENOLO)
STEP 2: FARE EVAPORARE IL COLORANTE SCALDANDO ALLA FIAMMA PER 5 MIN FINO ALLA COMPARSA DEI PRIMI VAPORI. GETTARE IL COLORANTE IN ECCESSO E LAVARE CON ACQUA
STEP 4: ESEGUIRE LA COLORAZIONE DI CONTRASTO VERSANDO BLU DI METILENE (1-2 MIN). RISCIACQUARE CON ACQUA E LASCIARE ASCIUGARE ALL’ARIA
STRISCIARE IL CAMPIONE IN ESAME SU UN VETRINO PORTAOGGETTI E FISSARLO AL CALORE:
STEP 3: DECOLORARE (2 MIN, CIRCA) CON SOLUZIONE ALCOOL-ACIDO (HCL 3% IN ETANOLO) FINO ALLA SCOMPARSA DEL COLORANTE. LAVARE CON ACQUA
CASI PARTICOLARI:
MICOBATTERI
GRAM-:
2 MEMBRANE, SPAZIO PERIPLASMICO, STRATO SOTTILE DI PEPTIDOGLICANO (LPS), E ISOENZIMI+ENZIMI PERIPLASMATICI
POICHE' PRESENTANO ACIDO-RESISTENZA, IL COLORANTE PENETRA SOLO SE FATTO AGIRE A CALDO
GRAM+:
UNA MEMBRANA, STRATO SPESSO DI PEPTIDOGLICANO, ACIDI TEICOICI E LIPOTEICOICI, ESOENZIMI
PARETE CELLULARE A STRUTTURA COMPLESSA (SIMILE A GRAM+) IN CUI IL PEPTIDOGLICANO È INTRECCIATO E LEGATO COVALENTEMENTE AD UN POLIMERO DI ARABINOGALATTANO
E CIRCONDATO DA UN STRATO DI LIPIDI COMPLESSATI CON LE CERE FORMATE DAGLI ACIDI GRASSI A LUNGA CATENA (ACIDI MICOLICI) DOTATE DI POTENTE AZIONE ADIUVANTE LA PATOGENICITA’.
MICOPLASMI
:
ASSENZA DI PARETE CELLULARE RIGIDA E PRESENZA DI STEROLI NELLA MEMBRANA CITOPLASMATICA
COLORAZIONE DI GRAM
SOLUZIONE 3
: UN AGENTE DECOLORANTE – ALCOOL 95%: (ALCUNE CELLULE SI DECOLORANO + FACILMENTE DI ALTRE PERMETTENDO LA DIFFERENZIAZIONE TRA BATTERI).
SOLUZIONE 2
: UN MORDENTE (IODIO) - SOLUZIONE DI LUGOL (ACCRESCE L’AFFINITÀ TRA CELLULA E COLORANTE FISSANDOLO SULLA CELLULA E RENDENDO PIÙ DIFFICILE LA DECOLORAZIONE).
SOLUZIONE 4
: UN COLORANTE DI CONTRASTO – SAFRANINA (È UN COLORANTE BASICO DI COLORE DIVERSO DAL CRISTAL-VIOLETTO.
I MICRORGANISMI CHE RISULTANO RESISTENTI ALLA DECOLORAZIONE TRATTENGONO IL COLORANTE BASICO INIZIALE (BATTERI GRAM- POSITIVI), GLI ALTRI (BATTERI GRAM-NEGATIVI) ASSUMONO IL COLORANTE DI CONTRASTO).
SOLUZIONE 1
: UN COLORANTE BASICO - CRISTAL VIOLETTO
CONFRONTO TRA LA PARETE CELLULARE DI BATTERI:
GRAM POSITIVI (A)
STRUTTURE: PEPTIDOGLICANO: STRATO SPESSO; ACIDI TEICOICI: PRESENTI; PERIPLASMA, MEMBRANA ESTERNA E LPS (ENDOTOSSINA), PORINE ASSENTI
GENERI RAPPRESENTATIVI: BACILLUS, STAPHYLOCOCCUS, STREPTOCOCCUS
CARATTERISTICHE GENERALI: SENSIBILITÀ PENICILLINA > SENSIBILITÀ; SENSIBILITÀ AL LISOZIMA; FORMA RISULTANTE DA LISI: PROTOPLASTO
COLORAZIONE VIOLETTO
GRAM NEGATIVI (B)
STRUTTURE: PEPTIDOGLICANO: STRATO SOTTILE; ACIDI TEICOICI: ASSENTI; PERIPLASMA, MEMBRANA ESTERNA E LPS (ENDOTOSSINA), PORINE PRESENTI
GENERI RAPPRESENTATIVI: E. COLI, PSEUDOMONAS, NEISSERIA
COLORAZIONE ROSA/ROSSO
CARATTERISTICHE GENERALI: SENSIBILITÀ PENICILLINA < SENSIBILITÀ; NO SENSIBILITÀ AL LISOZIMA; FORMA RISULTANTE DA LISI: SFEROPLASTO