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ALTRE COLORAZIONI - Coggle Diagram
ALTRE COLORAZIONI
OSSERVAZIONE MICROSCOPICA
I BATTERI GRAM+ (STAPHYLOCOCCUS SPP, STREPTOCOCCUS SPP, ETC) APPAIONO VIOLA
I BATTERI GRAM – (E. COLI, P. AERUGINOSA, NEISSERIACEAE , ETC) APPAIONO ROSSI
COLORAZIONE DI ZIEHL-NEELSEN
GETTARE IL COLORANTE IN ECCESSO E LAVARE CON ACQUA
STEP 2: FARE EVAPORARE IL COLORANTE SCALDANDO ALLA FIAMMA PER 5 MIN FINO ALLA COMPARSA DEI PRIMI VAPORI
STEP 3: DECOLORARE (2 MIN, CIRCA) CON SOLUZIONE ALCOOL-ACIDO (HCL 3% IN ETANOLO) FINO ALLA SCOMPARSA DEL COLORANTE
STEP 1: VERSARE LA FUCSINA FENICATA (FUCSINA BASICA IN ACQUA, ALCOOL E FENOLO)
RISCIACQUARE CON ACQUA E LASCIARE ASCIUGARE ALL’ARIA
STRISCIARE IL CAMPIONE IN ESAME SU UN VETRINO PORTAOGGETTI E FISSARLO AL CALORE:
LAVARE CON ACQUA
TECNICA PER IDENTIFICAZIONE DEI MYCOBATTERI
STEP 4: ESEGUIRE LA COLORAZIONE DI CONTRASTO VERSANDO BLU DI METILENE (1-2 MIN)
OSSERVAZIONE MICROSCOPICA
GLI ORGANISMI ACIDO-RESISTENTI (AFB) APPAIONO COLORANTI IN ROSSO
GLI ORGANISMI NON ACIDO-RESISTENTI RISULTERANNO COLORANTI IN BLU
COLORAZIONE NEGATIVA (CAPSULA)
SOSPENDERE IL MATERIALE SULL’INCHIOSTRO DI CHINA E COPRIRE CON UN VETRINO COPRIOGGETTO.
PRELEVARE CON UN ANSA STERILE UN PO’ DI MATERIALE BATTERICO DA UNA COLONIA ISOLATA.
METODICA: DEPORRE UNA GOCCIA DI INCHIOSTRO DI CHINA DILUITO AL 10% SU UN VETRINO PORTAOGGETTI
AL MICROSCOPIO:
L’AMBIENTE IN CUI SI TROVANO LE CELLULE BATTERICHE ED IL CORPO STESSO DEL BATTERIO APPAIONO COLORATE
CAPSULA RIMANE CHIARA (PRATICAMENTE BIANCA) E PUÒ ESSERE OSSERVATA COME UN ALONE CHIARO CHE CIRCONDA IL CORPO DEL BATTERIO.
I GRANULI MOLTO FINI DI COLORANTE DETERMINANO UNO SFONDO SEMIOPACO NEL QUALE SPICCANO LE CAPSULE CHIARE.
COLORAZIONE SPORE (SCHAEFFER-FULTON)
I COLORANTI NORMALMENTE UTILIZZATI SONO: VERDE DI MALACHITE; FUCSINA FENICATA
LA PARETE DELLE SPORE È RELATIVAMENTE IMPERMEABILE:
LA COLORAZIONE DELLE SPORE RICHIEDE CALORE X FACILITARE LA PENETRAZIONE DEL COLORANTE.
(VERDE DI MALACHITE, FUCSINA FENICATA) ATTRAVERSO GLI INVOLUCRI SPORALI.
METODICA
COLORARE ABBONDANTEMENTE CON VERDE MALACHITE, LASCIARE IL VETRINO ESPOSTO AL VAPORE CHE SI SVILUPPA PER 3-5’ E AGGIUNGERE ANCORA IL COLORANTE FACENDO ATTENZIONE CHE IL VETRINO NON RIMANGA A SECCO.
LAVARE CON ACQUA E COLORARE CON SAFRANINA (5’). DOPO AVER LAVATO ABBONDANTEMENTE CON ACQUA ASCIUGARE DELICATAMENTE
APPOGGIARE IL VETRINO SU UN SOSTEGNO SOPRA UNA VASCHETTA CONTENENTE ACQUA LA QUALE VERRÀ PORTATA ALL’EBOLLIZIONE.
ALLESTIRE E FISSARE UN VETRINO
SPORE DI BACILLUSCEREUS
AL MICROSCOPIO:
LE SPORE APPARIRANNO COLORATE CON VERDE MALACHITE, LE ALTRE PARTI DELLA CELLULA CON SAFRANINA
I PROCEDIMENTI + SEMPLICI PER EVIDENZIARE LA PRESENZA DI SPORE NEI BATTERI CONSISTONO NELL’ESAME A FRESCO DI SOSPENSIONI DI CELLULE BATTERICHE
(VISIBILI COME FORMAZIONI ENDOCELLULARI RIFRANGENTI) OPPURE CON METODI COMUNI DI COLORAZIONE (VISIBILI COME AREE NON COLORATE).