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MICOBATTERI DIAGNOSTICA DI LABORATORIO - Coggle Diagram
MICOBATTERI DIAGNOSTICA DI LABORATORIO
COLTURA IN TERRENO TRADIZIONALE
COLONIE RUGOSE (CAVOLFIORE)
TERRENO DI LOWENSTEIN
PREPARAZIONE DEI TERRENI DI COLTURA:
VIENE SCIOLTO A CALDO; VIENE DISTRIBUITO IN PIASTRA SOTTO LA CAPPA STERILE
E SI LASCIA SOLIDIFICARE
VIENE PESATO IL TERRENO; SI AGGIUNGE ACQUA DISTILLATA
PESATA DEGLI INGREDIENTI:
BISOGNA LAVORARE IN STERILITÀ
DISTRIBUZIONE NEI RECIPIENTI (TERRENI LIQUIDI); STERILIZZAZIONE IN CAPSULE DI PETRI (TERRENI SOLIDI)
DISSOLUZIONE DEGLI INGREDIENTI; CORREZIONE DEL PH AL VALORE DESIDERATO
CONTROLLO DELLA STERILITÀ DEI TERRENI
SEMINA DI TERRENO SOLIDO: STRISCIO, SPATOLAMENTO, INGLOBAMENTO O INCLUSIONE
IN BRODO, INOCULO, TRASFERIMENTO IN STERILITÀ DI CELLULE NEL TERRENO LIQUIDO CON ANSA O PIPETTA
LA SEMINA DEI TERRENI DI COLTURA CONSISTE NEL TRASFERIRE LE CELLULE DEL MICRORGANISMO ALLO STUDIO IN UN BRODO COLTURALE O IN UNA PIASTRA DI TERRENO COLTURALE AGARIZZATO
AGAR SABOURAUD
TERRENI PER MICETI
TERRENO SELETTIVO:
PH ACIDO; ANTIBIOTICI
TECNICA DELLA PIASTRA x DIFFUSIONE
PREPARAZIONE DI UNA PIASTRA PER DIFFUSIONE:
(1) DEPORRE CON UNA PIPETTA UNA GOCCIA DI MATERIALE AL CENTRO DI UNA PIASTRA CONTENENTE AGAR.
(2) IMMERGERE UN’APPOSITA BACCHETTA DI VETRO IN UN BEAKER CONTENENTE ETANOLO.
(3) FLAMBARE PER BREVE TEMPO LA BACCHETTA BAGNATA DI ETANOLO E LASCIARLA RAFFREDDARE.
(4) DISTRIBUIRE UNIFORMEMENTE, STRISCIANDO, IL CAMPIONE SULLA SUPERFICIE DELL’AGAR MEDIANTE LA BACCHETTA STERILE.
INCUBARE
ESAME COLTURALE (ISOLAMENTO)
LA CURVA DI CRESCITA
UNA CURVA DI CRESCITA IN UN SISTEMA CHIUSO (COLTURA BATCH)
PREVEDE DIVERSE FASI CORRELATE AL CONSUMO DEI NUTRIENTI E ALL’ACCUMULO DEI PRODOTTI DI SCARTO.
FASE ESPONENIALE (FASE LOG)
LA POPOLAZIONE CELLULARE È UNIFORME (ADATTA X STUDI BIOCHIMICI E FISIOLOGICI)
LA FASE ESPONENZIALE È UN ESEMPIO DI CRESCITA BILANCIATA
IN CUI TUTTI I COMPONENTI CELLULARI SONO SINTETIZZATI A VELOCITÀ COSTANTI E COORDINATE
LA CRESCITA RAGGIUNGE LA MASSIMA VELOCITÀ POSSIBILE
FASE STAZIONARIA
ALCUNE EVIDENZE SUGGERISCONO CHE LA CRESCITA PUÒ CESSARE QUANDO VIENE RAGGIUNTO UN LIVELLO CRITICO DI DENSITÀ UNICELLULARE.
I BATTERI METTONO IN ATTO RISPOSTE DI ADATTAMENTO ALLE CONDIZIONI AVVERSE
(PRODUZIONE DI ENDOSPORE, DIMINUIZIONE DELLE DIMENSIONI, SINTESI DI “STARVATION PROTEINS” (PARETE, DNA, PROTEINE))
UNA COLTURA ENTRA IN FASE STAZIONARIA:
X CARENZA DI OSSIGENO (X GLI AEROBI)
O X L’ACCUMULO DI METABOLITI TOSSICI (ES ACIDO LATTICO)
A CAUSA DELLA DEPLEZIONE DEI NUTRIENTI
RIPRODUZIONE BATTERICA (SCISSIONE BINARIA)
LA CELLULA INIZIA A DIVIDERSI, CON DISTRIBUZIONE DI UNA MOLECOLA DI DNA IN CIASCUNA CELLULA NEOFORMATA.
LA CELLULA BATTERICA SI ALLUNGA E IL DNA (IL SINGOLO CROMOSOMA BATTERICO) SI REPLICA.
LE 2 CELLULE FIGLIE POSSIEDONO MOLECOLE DI DNA IDENTICHE.
FASE DI MORTE
ALCUNE SPECIE DI BATTERI VANNO INCONTRO A LISI CELLULARE
SE LE CELLULE NON LISANO QUESTA FASE PUÒ ESSERE INAPPARENTE
(X AVERE DOTI PRECISI SI PUÒ FARE LA CONTA DELLE UFC)
INCUBAZIONE IN ANAEROBIOSI O MICROAEROFILIA
GIARA:
CONTENITORE IN CUI LA PRESENZA DI UN CATALIZZATORE (BICARBONATO DI SODIO E SODIO BOROIDRURO)
FAVORISCE, UNA VOLTA UMIDIFICATO, LA REAZIONE DI H2 E O2 CON FORMAZIONE DI H2O.
FASE DI LATENZA (FASE LAG)
CORRISPONDE AL TEMPO NECESSARIO ALLE CELLULE BATTERICHE X ADEGUARSI ALLE CONDIZIONI DEL TERRENO.
LA SUA DURATA DIPENDE: DAL TIPO DI INOCULO (ETÀ, PROVENIENZA) E DALLA NATURA DEL TERRENO.
LA FASE DI LATENZA È UN ESEMPIO DI CRESCITA SBILANCIATA: ALCUNI COMPONENTI SONO SINTETIZZATI E ALTRI NO.
PRIMA DI MOLTIPLICARSI VANNO SINTETIZZATI NUOVI RIBOSOMI X ADEGUARE IL RITMO DELLA SINTESI PROTEICA ALLE NUOVE DISPONIBILITÀ.
SE LA COLTURA È INVECCHIATA O DANNEGGIATA, È NECESSARIO RIPARARE I DANNI PRIMA CHE POSSA INIZIARE LA MOLTIPLICAZIONE.