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PERSPECTIVAS ACTUALES DEL USO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES Y SU IMPORTANCIA…

- - - - En caso que la región codificante no esté completa, se puede obtener la secuencia mediante empleo de primers degenerados.
- - - - Se puede obtener hasta un 50% de rendimiento de la PR
        
        Los tags, facilitan la purificación, solubilidad o transporte al periplasma
        
        Se obtiene el ADNc , se inserta en el vector y se usa enzimas de restricción para la identificación.
        
        Se transforma a la bacteria con el vector, crece en un medio según la resistencia del vector y en fase exponencial se agrega el inductor. Se recupera la PR mediante cromatografía.
  - - - Se produjo con éxito la lisozima del
        camarón (gamba) blanco Litopenaeus vannamei, la timidilato sintasa del WSSV, la glutatión-S-transferasa, la nucleótido cinasa, la
        timidina monofosfato cinasa del WSSV
- - - - La E.coli, no es capaz de realizar modificaciones post-traduccionales pero existen vectores que ayudan a hacer estas modificaciones como el vector pET12a*
      - Los utilizados son los microorganismos 55 % (del cual 39 % corresponde a E. coli y un 15 % a levaduras ) y células de mamífero, específicamente células de ovario de hámster (CHO), con un 35 %.
      - Líneas celulares: DE3 (Contiene el promotor Lac V5), pLysS ( Contiene Lisozima T7)
        
        Algunas PR, contienen codones raros que deben ser insertados para lo cual existen productos comerciales.
      - En este organismo se producen: renina, amilasas, proteasas y celulasas, proteínas
        terapéuticas, como insulina, hormonas de crecimiento e interferones
        
        Lactococcus lactis y Bacillus subtilis, también se utilizan para producción de PR
    - - Se usa para producir PR tóxicas o que no se puede plegar correctamente en E. coli
        
        Se obtienen rendimientos mayores al 50%
    - - Líneas celulares CHO y HEK293 se han optimizado protocolos que permiten la producción de proteínas con un alto rendimiento
    - - la producción de PR en semillas es la plataforma más utilizada
        
        En 1986 se produjo la hormona de crecimiento humana en plantas de tabaco transgénicas
        
        Poseen bajo nivel de acumulación
        
        Son altamente influenciados por los factores ambientales
        
        En el cultivo en biorreactor, reduce la contaminación potencial de endotoxinas y micotoxinas derivadas de las plantas y del suelo y minimiza el silenciamiento post-transcripcional de genes
        
        Las PR se almacenan en la vacuola con la ayuda de señales específicas
- - - - Producción de compuestos activos, intermediarios terapias.
    - - Detección de contaminantes mediante anticuerpos monoclonales
    - - Mejora el proceso de manufactura mediante el uso de enzimas
    - - Aplicaciones en la fabricación secado y terminación de productos, adición de enzimas en detergentes
    - - Procesos de producción, generación de aditivos y conservadores
    - - Uso de enzimas en procesos de producción de biocombustibles