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Séquençage prot - Coggle Diagram

- - - - dépôt sur surf solide
        
        sécher puis trier avc 1 laser deds, les projetant jusqu'à détecteur
    - - solut° arrive par capillaire puis nébuliser (très fine gouttelettes)
        
        donne + état de charge
      - acquiert nbr variable de protons
      - analyse en condit° natives
      - série de pics = massif isotopiqe
  - - - analysé par détecteur
    - - peptides fragmentés aussi comparés
  - - - 1 prb : Leu et Ile m ^ masse
- - - - réduct° ponts disulfures -> AA libres
        
        chromato : élut° avc gradient pH et salin
        
        traitemt à ninhydrine
        
        détect° spectrophotométriuqe : colorat° bleue
        
        dimétisat°
        
        surf chq pic chromatogramme proportionnelle à quantité relative de chq AA
    - - fonct° amide transformées en fonct° carboxyles
        
        Asn -> Asp
        
        Gln -> Glu
      - Trp dégradé
  - - - identificat° par chrom (HPLC)
      - fixé réactif chim sur AA N-ter
        
        réactif réagit avc fonct° amine puis hydrolyse
        
        AA séparé par chroma : identifier par chromatogrammes de comparaison
  - - - automatisat° séquençage ptt peptides via séquencer
        
        efficace à 99 %
    - - oxydat° à acide performique
      - réactif chim fixé sur fonct° amide