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Prot structure - Coggle Diagram

- - - - au pI: charge = 0
      - pH > pI : charge -
      - pH < pI : charge +
    - - sample inject° vol
        
        gradient elut°
        
        wash
        
        re-equilibrat°
    - - carboxyméthyl -
        
        pr échangeur cat° +
        
        cellulose/agarose
      - diéthylaminoéthyl +
        
        échangeur an° -
  - - - ralentir passage mol en phase mobile
    - - plus ptttes prennent du tps à arriver en bas colonne
    - - 1 peu rentrées ds billes et vont ê 1 peu ralenties
  - - - diminue fortemt pH : env pH 3
        
        risque dénaturat° prot car pH acide
    - - adsorpt° of sample and elut° of unbound material
        
        wash away unbound materiel
        
        elute bourd prot
        
        re-equilibrat°
  - - - obtenu par co-polymérisat° acrylamide et méthylène bis-acrylamide
        
        % acrylamide et bis-acrylamide détermine taille mailles
    - - associat° aux prot = dépliemt structure
        
        1 mol SDS pr 2 résidus d'AA
      - ttes prot chargées négativemt
      - migrat° sur gel dépend uniquemt taille
        
        ptt prot migrent + rapidemt
  - - - qd charge nette nulle = arrêt migrat°
  - - - pr enz : quantité indirectemt mesurée par mesure effet catalytique
        
        = transforme substrat de réact°S en produit de réact° P
      - moy détecter + quantifier prot en présence autres prot
      - unité enz (U° = quantité enz (ds prép) causant transf µM de substrat par min à 25° ds condit° optimales de mesure
        
        act tot (AT) = nbr tot U ds prép
        
        rendemt = AT étape 2/AT étape 1
        
        act spé (AS) = nbr U par mg prot tot
        
        augmente lors purificat° enz
        
        max + cste qd enz pure
        
        enrichissemt = AS étape 2/AS étape 2
        
        act enz (AE° = nbr U par mL solut°