Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Polymerase kettingreactie - Coggle Diagram
Polymerase kettingreactie
Techniek gebruikt om meerdere kopieën te maken van een segment DNA
Apmlificatie van DNA segmenten maakt het mogelijk om
Identificatie van individuelen
andere wetenschappelijk onderzoek met DNA manipulatie
Detectie van virussen of bacteriën
3 hoofzakelijke stappen
Annealing
DNA gebied dat wordt gekopieerd specifieren
Extensie
Kopieert het DNA
Denaturatie
Scheidt de 2 strengen DNA
Deze stappen zulle constant worden herhaald
Dit gebeurt dus exponetieel
Denaturatie
Dna wordt opgehit tot 95° C
Waterstoffbruggen tussen de 2 strengen breken
Enkele seconden
Elke cyclus heeft een kortere denaturatie
Vaak tussen 30-60 seconden
Annealing
Specifiëren van DNA gebied word gedaan met behulp van primers
Elke reactie heeft 2 soorten primers
Voorwaartse primer
Komt overeen met sequentie op 1 DNA streng op begin van het gebied dat geamplificeerd wordt
Achterwaartse primer
Op het uitende van gebied, aan de andere streng
Primers zijn 20 basen lang
Als het DNA wordt afgekoeld zulle de primers zich hechten aan het DNA
Waterstofbruggen worden gemaakt tussen primers en DNA
Temperatuur tussen 50 - 65 °C
Reactie duurt 5 - 30 seconden
Extensie
Temp verhoogt weer (72 °C)
DNA polymerase
Bind zich aan beide korte dubbelstrengige DNA gebieden
Beweegt van 5' naar 3' richting
Voegt de complementaire DNA nucleotiden toen
Tijd varieert adhv lengte
Gebruiken Taq polymerase omdat het niet bij 72°C denatureerd
Thermal cycler
Machine waar dit proces plaatsvindt
Benodigdheden voor process
dNTPs
Buffer
Polymerase
Primers
Template DNA