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VALORACION FUNCIONAL DE LOS LINFOCITOS MEDIANTE CITOMETRIA DE FLUJO, DE…
VALORACION FUNCIONAL DE LOS LINFOCITOS MEDIANTE CITOMETRIA DE FLUJO
Valoración funcional de los linfocitos mediante citometría de flujo
Marcadores inducidos a comprobar competendia del Linfocito T:
CD69, CDIS4 (CD40), MHC IM, CD25
CD40L en la superficie y se usa un ligando (cd40ulg)
(diagnóstico de gammaglobulinemia ligada al x)
Viabilidad funcional de los linfocitos
Anexina V permite visualización de células apoptóticas
traslocación de la fosfatidilserina Ps de la membrana a la superficie
las celulas apoptoticas s observaran en la Superficie
Medida de la citotoxixidad celular
-La citotoxicidad: mecanismo que permite eliminar células infectadas por microorganismos patógenos
Los linfocitos T CD8 son considerados citotóxicos
Linfocitos T CD4 citotoxicos, infrecuentes en la circulacion y se activan en infeccionee virale virales como: VIH, CMV, ENFERMEDADES AUTOINMUNES
Valorar potencial citotoxico midiendo presion intracelular de granzima y perforinayla desgranulacion tras estimulo
Activación citotóxica se ha medido en virtud de la liberación de cromo (51Cr) en células Diana
expresion de CD107a
junto a tetrameros del MHC 1
Valoración de las vías transmisoras de señales y de reparación del ADN en los Linfocitos
Phospholow
pueden valorarse la activación y la inducción de vias transmisoras de señales especficas
pero es posible usar uno o varios estímulos
la tinción intraceluar puede efectuarse con anticuerpos fosfoespecificos
Detección de fosfoproteínas en la citometría de flujo
Evaluación de la función de los linfocitos t reguladores (treg)
Subgrupo de linfocitos esenciales para el mantenimiento de homeostasis y auto tolerancia inmunitaria
In vitro mediante pruebas de inhibición que utilizan Ln Treg seleccionados CD4+ CD25+ con el fin de valorar la inhibición de proliferación
Activacion y funcion de las Celulas nk
su anhibicion esta a cargo de receptores que reconocen el MHC 1 que evitan la autotoxicidad
no destruyen a Diana que expresan MHC 1
diana con MHC 1 inhibido son exuestas a citotoxicidad de NK
Medida de la competencia de los linfocitos por proliferación
Mitógenos: estimuladores potentes de la actlvación de los linfocitos Te Inducen a su proliferación policlonal
Las lectinas mitógenas se unen al TCR
La PHA: potente mitógeno en los linfocltos T PWM: débl mitógeno en linfocitos T, pero Induce a activación y proliferación del Linfocito B
DE LEON JARAMILLO WILLIAMS CECILIO 304