Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Electrophorèse protéines sériques P2 - Coggle Diagram
Electrophorèse protéines sériques P2
Utilité électrophorèse
Séparat° des prot afin d'avoir classes diff -> sert en méd + industrie alimentaire
Applicat° prot sériques
Albumine ->fract° + représentée dn sérum du patient
a1,a2,b1,(b2) présent ou non selon techniques utilisées
gamma-globulines
Selon technique utilisée -> obtent° 5 ou 6 fract°
Variat° des taux de prot informent sur les organes qui les synthétisent -> tt synthétisés par foie sauf Ig par plasmocytes (=LB différenciés qui fabriquent des Ac/Ig qui se retrouvent dn zone des gammaglobulines)
Rôle prot
Albumine : maintien de la pression oncotique, transp de mol (médicaments…)
Protein C reactive (CRP) : marqueur inflammat°
Fibrinogène : intervient dn processus de coagulat° en se tranf en fibrine
Alpha-1 antitrypsine : inhibit° des protéases
Immunoglobulines : défenses immunitaires
Protéines du complément : défenses immunitaires
Hypoprotidémie
Dose des prot globales -> protidémie dn sang et protéinurie dn urines
Défaut apport :
Malnutrit° -> chez pers âgées
Malapsorpt° intestinale -> insuffisance pancréatique
Déficit de synthèse -> insuffisance hépatique -> fait que le foie en fabrique plus prot engendre hypoprotidémie
Augmentat° des pertes :
Rénales -> syndrome néphrotique
Cutanées -> brûlures étendues
Digestives -> entéropathie exsudative/ diarrhées profuses
Hyperprotidémie
2 gdes causes :
déshydratat° EC
Hypergammaglobulinémie
Pathologie monoclonale -> Gammapathie monoclonale
Pathologie polyclonale -> maladies auto-immune
Fonctionnement électrophorèse
Séparat° prot liée :
Caractère amphotère -> radicaux amines (R-NH3+) et carboxyliques (R-COO-)
pH isoélectrique
Ionisat° qui leur permet d'avancer champ électrique
Vitesse de migrat° est f° de leur taille, force ionique et porosité du support
Electrophorèse capillaire ou "libre"
Mol st en solut° dn veine liquide contenue dn tube capillaire de faible diamètre (10 à 200 µm)
Détection par absorpt° lumineuse, UV ou en fluorescence
Avantages
Technique simple et rapide
Faible volume d'échantillon
Faible coût de fonctionnement
Séparation, identification et quantification en 1 seule étape
Séparation de très nombreuses molécules
Très bonne séparation des fractions ß1 et ß2
Meilleure reproductibilité des mesures
Inconvénients
Equipement coûteux
Pas de séparation de protéines neutres -> utilisation de gels
Limite de détection moins bonne (500mg/L contre 150mg/L)
Risque de faux négatif si pic monoclonal très cathodique
Pas d’intervention de l’œil du biologiste
Electrophorèse en gel "de zone"
Migrat° prot se fait dn gel d'agarose -> plusieurs étapes
Certain nb de prot, entraînées dn gel, grosses mol s'arrêtent en 1er car elles seront bloquées dn gel et autres continuent et s'arrêtent en f° de leur taille
Ces mol ne sont pas visibles => étape de colorat° (proportionnelle à la qtt de prot présentes), attendre que ça sèche puis intégrer qtt pr obtenir un tracé (f° de qtt des prot et de leur taille)
Profil électrophorétique normal
A savoir SCHEMA
Pic albumine qui correspond à + gde qtt dn sérum.
5 fract° car c'est technique qui utilise gel qui ne sépare pas en 6 fract° -> b1 et b2 ne sont pas séparés mais sont identifiés en groupe
Technique diff, + précise -> autre profil électrophorétique lui aussi normal -> sépare b1 et b2
Anomalies
Qualitative
Présence d’un pic supplémentaire (Ig monoclonale, autre?…)
Pic supplémentaire -> généralement étroit, d’importance et de posit° variables, + svt qd pic est en gammaglobuline c'est synthèse clonale plasmocytaire d'une Ig monoclonale mais pas tjrs
Ex 1 -> Bisalbuminémie -> pic albumine est anormale, patients peuvent être bien portants, cela peut être due à anomalie génétique, ttt par bêtalactamines à forte dose ou à des acides biliaires dn cadre de fistule pancréatiques
Ex 2 -> pic supplémentaire étroit anormal dn zone de gammaglobulines, se demande tjr si Ig monoclonale mais cela peut être aussi à cause CRP élevée, inject° PCI (prod contraste iodée), du fibrinogène => imp de transmettre bons renseignements cliniques afin interpréter au mieux examen
Prélèvement sur anti-coagulant, patient traité par anti-coagulant à forte dose
Ex 3 -> 2 pics dn zone b2 -> prélèvement a été réalisé après inject° PCI au patient, ce qui a faussé résultats => imp de préciser au biologiste ttt précédemment reçus par patient
Quantitative
D’une ou plusieurs fractions
Diminut° de certaines fract° => penser aux hypogammaglobulinémie et diminut° de certains composé C3 et C4
Prélèvement doit être réalisé dn jours suivants -> peut pas refaire la technique car certaines prot même gardées au frais peuvent se dégrader ce qui provoque des baisses de composés
Augmentat° de centaines f° -> hypergammaglobulinémie et syndrome inflammatoire
Qualitative(s) ET quantitative(s)
Intérêt
Informe sur état inflammatoire et nutritionnel du patient
En cas de suspicion du myélome -> dépister et suivre gammapathie monoclonale, dn ce cas : on s'oriente vers examens complémentaires -> immunofixat° sérique et urinaire
Immunofixation
Examen de 2ème intention, réalisé après l’électrophorèse sérique, réalisé au labo immunologie
Principe
Incubat° avec diff anti-sérums monospécifiques :
Anti-chaînes lourdes d’Ig -> anti-gamma; anti-alpha; anti-mu; anti-delta; anti-epsilon
Anti-chaînes légères d’Ig -> anti-kappa et anti-lambda
Visualisat° de la précipitat° in situ des Ig révélées
après lavage et colorat°
1-Dépôt de sérums -> fait manuellement
2-Migration
3-Incubation avec antisérums
Résultat et interprétat°
Ig polyclonale -> plusieurs clones/plasmocytes diff vont chacun prod leur Ig avec rép très large -> précipité diffus + ou - large
Ig monoclonales -> si 1 clone s'est différencié qui prod une seule Ig -> : bande étroite révélée par un anti-sérum anti-chaîne
lourde associé à une bande étroite révélée avec un antisérum anti-chaîne légère
Bande étroite anti-chaîne légère uniquement : MM à chaîne légère
Même niveau de migrat° que la bande étroite présente sur la piste témoin d’électrophorèse
Cas cliniques cf ronéo p17 à p22
Interférences
Pré-analytiques
Avt l'analyse
Prélèvement si hémolysé sera ininterprétable -> infirmière prélève sur un tube anticoagulant -> aura plasma, fibrinogène et cela créera des interférences
Ce type de prélèvement est susceptible d’être annulé à la récept° après centrifugat° car le résultat sera ininterprétable
Lactescence
Subs issues d’une perturbat° du métabolisme patient
Fibrinogène dn contexte patient traité par anticoagulants à forte dose, ce la s'apparente au prélèvement dn tube contenant anticoagulant -> pic dn zone des gammaglobulines
Anomalie génétique
Ttt par bêtalactamines à forte dose
Fistule pancréatique -> sels biliaires
CRP -> voir pic dn zone des gammaglobulinémie
Bilirubine
Subs exogènes thérapeutiques
ATB, Ac monoclonaux
Certains prod de remplissage et Ig polygonales (augmentat° zone gammaglobulines) qui vont donner des anomalies sur tracés
Subs exogènes administrées dn but diagnostiq
Produits de contraste iodés
Prélèvement avt que patients reçoive les ttt -> si pas possible il est imp informer biologiste de ces diff administrat°
Ttt par biothérapie
New ttt, Ac mnoclonaux d'isotope IgG kappa car st + simples à produire
Vérificat° de isotype à immunofixat°
Daratumumab (MM en rechute et réfractaire)
Elotuzumab (MM en rechute)
Isatuximab (MM en rechute et réfractaire)
Adalimumab (MICI, PR)
Rituximab (LLC, LMNH, PR)
Cetuximab (cancer ORL et colorectal métastatique)
Bevacizumab (cancer colorectal métastatique)
Nécessité de demander des renseignements cliniques -> protocole? nom des molécules reçues?
Conclusion
S
imple et rapide, l’électrophorèse est une analyse de "routine"
N
e coûte pas cher mais peut rapporter gros (MM)
I
nforme sur l’état inflammatoire et nutritionnel du patient
G
ammapathie monoclonale? Demander immunofixat°
E
viter les interférences ou y penser…