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Modificación genética y biotecnología - Coggle Diagram
Modificación genética y biotecnología
Reacción en cadena de la Polimerasa
Definición
Es una reacción química que los biólogos moleculares utilizan para amplificar (crear copias) fragmentos de ADN.
Esta reacción permite que unos pocos fragmentos de ADN se repliquen en millones o miles de millones de copias.
Elementos en la PCR
Taq polimerasa
Cebadores
ADN molde
Nucleotidos
Los ingredientes se colocan en un tubo, junto con los cofactores que necesite la enzima, y se someten a ciclos repetidos de calentamiento y enfriamiento que permiten la síntesis del ADN.
Proceso
Desnaturalización
La reacción se calienta bastante para separar, o desnaturalizar, las cadenas de ADN. Esto proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente paso.
Alineamiento
La reacción se enfría para que los cebadores puedan unirse a sus secuencias complementarias en el molde de ADN de cadena sencilla.
Extensión
La temperatura de la reacción se eleva para que la Taq polimerasa extienda los cebadores y sintetice así nuevas cadenas de ADN.
Este ciclo se repite 25-35 veces en una reacción de PCR típica, que generalmente tarda 2-4 horas, según la longitud de la región de ADN que se copia. Si la reacción es eficiente (funciona bien), puede producir miles de millones de copias a partir de una o unas cuantas copias de la región blanco.
Utilidad
Mediante el uso de la PCR, una secuencia de ADN se puede amplificar millones o miles de millones de veces y producirá suficientes copias de ADN para que se analicen mediante otras técnicas.
Electroforesis en Gel
Definición
La electroforesis en gel es una técnica utilizada para separar fragmentos de ADN según su tamaño
Las muestras de ADN se cargan en pozos (ranuras) en un extremo de un gel y se aplica una corriente eléctrica para arrastrarlas a través del gel.
Proceso
Como su nombre lo indica, en la electroforesis en gel participa un gel: un bloque de material similar a la gelatina
Los geles para separar ADN suelen estar hechos de un polisacárido llamado agarosa
Antes de agregar las muestras de ADN, el gel debe colocarse en una cámara. Uno de los extremos de la cámara se conecta a un electrodo positivo y el otro extremo se conecta a un electrodo negativo.
Se aplica energía eléctrica a la cámara y empieza a fluir corriente a través del gel. Los grupos fosfato de su esqueleto de azúcares-fosfato le otorgan una carga negativa a las moléculas de ADN, por lo que comienzan a moverse a través de la matriz de gel hacia el polo positivo
Antes de agregar las muestras de ADN, el gel debe colocarse en una cámara. Uno de los extremos de la cámara se conecta a un electrodo positivo y el otro extremo se conecta a un electrodo negativo.
Visualización
Una vez que los fragmentos se han separado, podemos examinar el gel y saber el tamaño de las bandas que se encuentran en él. Cuando un gel se tiñe con un pigmento que se une al ADN y se coloca bajo luz UV, los fragmentos de ADN brillarán, lo cual nos permite ver el ADN presente