Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Theory and Principles of UV-1280 - Coggle Diagram
Theory and Principles of UV-1280
ทฤษฎีและหลักการพื้นฐาน
แสงและสเปกตรัมแม่เหล็กไฟฟ้า
แสงเป็นคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้าที่มีช่วงความยาวคลื่นแตกต่างกัน
รังสีอัลตราไวโอเลต (UV) อยู่ในช่วง 190-400
แสงที่ตามองเห็น (Visible) อยู่ในช่วง 400-700 nm
การเปลี่ยนระดับพลังงานอิเล็กตรอน สี และการดูดกลืนแสง
โมเลกุลดูดซับพลังงานแสง ทำให้อิเล็กตรอนกระโดดไปยังระดับพลังงานที่สูงขึ้น
การดูดกลืนแสงของสารทำให้เกิดสีที่มองเห็น (สีที่เห็นคือสีตรงข้ามกับสีที่ถูกดูดซับ)
กฎของเบียร์-แลมเบิร์ต
สูตร: A = εcl (A = การดูดกลืนแสง, ε = ค่าการดูดกลืนจำเพาะ, c = ความเข้มข้น, l = ความยาวของเซลล์ตัวอย่าง)
ข้อจำกัดของ UV-Vis
ไม่สามารถใช้วิเคราะห์สารที่ไม่มีการดูดกลืนแสงในช่วง UV-Visible ได้
อาจได้รับผลกระทบจากสิ่งเจือปน แสงกระเจิง และตัวทำละลาย
ต้องใช้สารมาตรฐานที่เหมาะสมเพื่อความแม่นยำ
โครงสร้างและส่วนประกอบของเครื่อง UV-1280
โครงสร้างของเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์
The Light Source
ปล่อยแสงในช่วงความยาวคลื่นที่ต้องการ
ใช้ช้หลอดไฟทังสเตน-ฮาโลเจน และ หลอดไฟดิวเทอเรียม
The Monochromator
คัดเลือกแสงเฉพาะความยาวคลื่นที่ต้องการ
ใช้ปริซึมหรือเกรตติงในการกระจายแสง
Detector
ตรวจจับปริมาณแสงที่ผ่านตัวอย่าง
แปลงแสงเป็นสัญญาณไฟฟ้าเพื่อคำนวณค่าการดูดกลืนแสง
ประเภทของเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์
Single Beam Spectrophotometer
Double Beam Spectrophotometer
การวัดค่าการดูดกลืนแสง (Absorbance) และการตั้งค่าเครื่อง
การเลือกคิวเวตสำหรับตัวอย่างที่มีความเข้มข้นสูงและต่ำ
ตัวอย่างความเข้มข้นสูง → ใช้คิวเวตที่มีเส้นทางแสงสั้น เช่น 1 มม. เพื่อลดการดูดกลืนแสงที่มากเกินไป
ตัวอย่างความเข้มข้นต่ำ → ใช้คิวเวตที่มีเส้นทางแสงยาวขึ้น เช่น 10 มม. เพื่อเพิ่มความแม่นยำในการวัด
ความยาวเส้นทางแสง
ความยาวเส้นทางแสง (path length) ของคิวเวตโดยทั่วไปคือ 10 มม.
มีผลต่อค่าการดูดกลืนแสง ยิ่งเส้นทางแสงยาว ค่ายิ่งเพิ่มขึ้น
ค่าการดูดกลืนแสงและสเปกตรัมของตัวทำละลาย
ตัวทำละลายบางชนิดดูดกลืนแสงในช่วง UV-Vis ซึ่งอาจรบกวนการวิเคราะห์
การปรับค่าอ้างอิงและการชดเชยสัญญาณรบกวน
ตั้งค่า Blank (ค่าอ้างอิง) ด้วยตัวทำละลายก่อนวัดตัวอย่าง
ใช้ฟังก์ชัน Baseline Correction เพื่อลดผลกระทบจากสัญญาณรบกวน
โหมดการทำงานของ UV-1280
Photometric
Spectrum
Quantitation Mode
Kinetics
ติดตามการเปลี่ยนแปลงของ Abs ตามเวลา
Time Scan
บันทึกการเปลี่ยนแปลงของ Abs ตามช่วงเวลาที่กำหนด
Multi-Component
Bio-Method
Utilities