Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Spectrophotometer Kinetic mode, Software Control, นางสาวสายสุณี หวังสกุล…
Spectrophotometer Kinetic mode
เครื่อง UV-1280
เครื่อง UV-1280 เป็นเครื่องสเปกโทรโฟโตมิเตอร์แบบ UV-Vis ที่ทำงานบนหลักการของการดูดกลืนแสง (Absorption Spectroscopy) ตามกฎของ Beer-Lambert ซึ่งระบุว่า “ปริมาณแสงที่ดูดกลืนเป็นสัดส่วนโดยตรงกับความเข้มข้นของสารละลายในคิวเวตต์”
⭐️ ประเภทของเครื่อง UV-1280
1. Single-Beam Spectrophotometer: แบบลำแสงเดี่ยว
2. Double-Beam Spectrophotometer: แบบลำแสงคู่
💛
วิธีการใช้เครื่อง
1. เตรียมตัวอย่างโดยใส่สารละลายลงในคิวเวตต์ที่เหมาะสม
2. เปิดเครื่องและตั้งค่าพื้นฐาน เช่น ความยาวคลื่นที่ต้องการวัด
3. ทำ Blank Measurement เพื่อปรับค่าอ้างอิงของตัวทำละลาย
4. วัดตัวอย่างโดยการใส่คิวเวตต์ที่มีสารละลายเข้าไปและบันทึกค่าการดูดกลืนแสง
5. วิเคราะห์ข้อมูล สามารถใช้ Calibration Curve หรือ Kinetic Mode ได้
⚡️ ส่วนประกอบหลักของเครื่อง UV-1280
แหล่งกำเนิดแสง (Light Source)
Monochromator
ตัวตรวจจับแสง (Detector)
Sample Compartment (ช่องใส่ตัวอย่าง)
รองรับคิวเวตต์ที่หลากหลาย เช่น คิวเวตต์ควอตซ์ หรือพลาสติก
ใช้ Photomultiplier Tube (PMT) หรือ Silicon Photodiode
เพื่อวัดค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง
แยกแสงให้เป็นช่วงความยาวคลื่นที่ต้องการใช้งาน
ใช้ Deuterium Lamp สำหรับช่วง UV (190 – 350 nm)
ใช้ Tungsten Halogen Lamp สำหรับช่วง Visible (350 – 900 nm)
Kinetic Mode
Kinetic Mode จะทำงานโดยวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่นเฉพาะเจาะจงในช่วงเวลาที่กำหนด เพื่อนำไปวิเคราะห์อัตราการเกิดปฏิกิริยา เช่น การสลายตัวของสาร หรือการเกิดปฏิกิริยาเอนไซม์
⛱️ ข้อดีของ Kinetic mode
สามารถติดตามปฏิกิริยาเคมีและชีวเคมีในระยะเวลาจริงได้และช่วยคำนวณอัตราการเกิดปฏิกิริยาได้แม่นยำมากขึ้น รวมถึงสามารถใช้วิเคราะห์ตัวอย่างที่มีการเปลี่ยนแปลงตลอดเวลาได้เช่นกัน
💥ข้อเสียของ Kinetic mode
ต้องตั้งค่าพารามิเตอร์อย่างถูกต้อง เพราะอาจทำให้ผลลัพธ์คลาดเคลื่อนได้ และจะต้องมีการอ้างอิงค่าพื้นฐาน (Baseline Correction) เพื่อป้องกันความผิดพลาดในการวิเคราะห์
📍การประยุกต์ใช้
ใช้ในการศึกษาปฏิกิริยาเอนไซม์ (Enzyme Kinetics)
อัตราการเร่ง หรือ การเปลี่ยนแปลงของสารตั้งต้น
การสลายตัวของสารเคมี (Chemical Degradation)
การเปลี่ยนแปลงของสารที่ถูกเร่งปฏิกิริยาโดยปัจจัยภายนอก
ใช้ในวิเคราะห์ทางชีววิทยา (Biological Assay)
วิเคราะห์ DNA / RNA
ฟังก์ชันหลักของ Kinetic Mode ใน Local mode
Time Scan
Kinetics
Kinetics (Activity rate)
คำนวณอัตราการเกิดปฏิกิริยาโดยเปรียบเทียบค่าการดูดกลืนแสงที่แตกต่างกันตามช่วงเวลา
Kinetics (Discriminatior)
ใช้พิจารณาค่าอัตราการเกิดปฏิกิริยาภายใต้เงื่อนไขที่กำหนด และใช้เพื่อวิเคราะห์ข้อมูลที่มีการเปลี่ยนแปลงช้าเกินไปหรือเร็วเกินไป
การวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงของสารในปฏิกิริยา
• ใช้สำหรับการเก็บข้อมูล Absorbance เทียบกับเวลา
• สามารถตั้งค่าระยะเวลาการเก็บข้อมูล และ ช่วงเวลาห่างของการเก็บข้อมูล (cycle)
• บันทึกข้อมูลได้สูงสุด 8 ตัวอย่างพร้อมกัน
:fire: การทำงานของ Kinetic Mode
Auto Aero/ Baseline Correction
ตั้งค่าพื้นฐานก่อนเริ่มการทดลอง
กำหนดค่าพารามิเตอร์ต่างๆ
❤️ ความยาวคลื่น
❤️ ระยะเวลาที่ใช้ในการวัด,
❤️ ขอบเขตการแสดงผลกราฟ
Blank Replacement:วัดค่า Blank ก่อนวัดตัวอย่าง
เริ่มการวัดค่าการดูดกลืนแสงของสารตัวอย่างตามช่วงเวลาที่ต้องการ
บันทึกข้อมูลและเปรียบเทียบข้อมูล แบบ Real time
สามารถบันทึกข้อมูลในรูปแบบที่รองรับใน Excel หรือ ซอฟต์แวร์ UV Probe ได้ อีกทั้งยังสามารถบันทึกข้อมูลลง USB flash drive ได้
Software Control
UV Probe สามารถควบคุมผ่านคอมพิวเตอร์และกำหนดค่าพารามิเตอร์เพิ่มเติมได้
คำนวณทางสถิติ
นางสาวสายสุณี หวังสกุล รหัสนักศึกษา 6604071630446