Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
come selezionare i cloni ricombinanti - Coggle Diagram
come selezionare i cloni ricombinanti
il processo si basa sull'uso di geni marcatori presenti nei vettori.
geni marcatori
permettono di identificare le cellule
che hanno acquisito il DNA esogeno
l’inattivazione inserzionale
sfrutta l'interruzione di un gene
come il gene di resistenza a un antibiotico
esempio
l’α-complementazione
Plasmide pBR322
contiene geni per la resistenza agli antibiotici
e siti di clonaggio
L'inserimento del DNA esogeno in uno di questi geni.
interrompe la sua funzione
Selezione
cellule trasformate vengono
coltivate in un terreno contenente ampicillina
altro metodo di selezione
proteina GFP
espressa dalle cellule trasformate
permette di visualizzare direttamente
quelle che hanno incorporato con successo il DNA esogeno
Tecnica bianco/blu
per distinguere i cloni ricombinanti da quelli non ricombinanti.