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ESPERIMENTO MESELSON & STAHL - Coggle Diagram
ESPERIMENTO MESELSON & STAHL
l'esperimento ha fornito un suppoto conclusivo per la replicazione semiconservativa nei batteri e ha consetito di escludere sia la modalità conservativa sia quella dispersiva
in questo esperimento si vuole provare la replicazione del DNA nei cromosomi batterici, come in E.Coli, che segue il
meccanismo di replicazione semiconservativa
ogni molecola di dna replicato consiste in:
filamento "vecchio", che ha svolto il ruolo di stampante
filamento "nuovo"
si fecero crescere per molte generazioni E.Coli in mezzo con NHCl (N15), come unica fonte di N.
N15 = isotopo pesante di N
Le molecole che lo contengono sono più dense, rispetto a quelle che contengono N14
le generazioni successive, in tutte le molecole che contenevano N, incluse le basi azotate, contenevano l'isotopo più pesante
:!: IMPORTANTE :!:
Aspetto critico per il successo dell'esperimento è stato che N14 e N15 sono distinguibili con
centrifugazione in gradiente di densità
i campioni furono forazati a passare mediante centrifugazione
attraverso un gradiente di densità di un sale di un metallo pesante
(es. cloruro di cesio)
le mol di DNA raggiungeranno l'equilibrio una volta che la loro densità eguaglierà la densità del mezzo
DNA N15 raggiungerà questo equilibrio più vicino al fondo rispetto a DNA N14
5) TERZA GENERAZIONE: risultati simili ma la proporzione della banda leggera stava aumentando
4) DOPO 2 DIVISIONI CELLULARI:
due bande di densità
, una intermedia e una più leggera (corrispondente alla posizione di N14 nel gradiente)
3) dopo una generazione: DNA presente solo in una singola banda di densità intermedia. ogni molecola replicata composta da
nuovo filamento n14 + vecchio filament n15
2) dopo tante generazioni,isolato DNA da ogni campione e sottoposto a centrifugazione in gradiente di densità
1) cellule marcate N15 trasferite in mezzo 14NHCl
è quello che ci si aspettava da una predizione di r. semiconservativa, ma esclude quella conservativa (in questo caso avremmo avuto due bande diverse, una di nuova sintesi e una originale)
scarta l'ipotesi della teoria dispersiva, perchè ci sarebbe una sola banda intermedia.