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Extraction des acides nucléiques, 75 min - Coggle Diagram
Extraction des acides nucléiques
étapes
Lyse des GR / Extraction des GB
Lyse des GB / Extraction de l'ADN
Précipitation de l'ADN
Sources de l'ADN
Leucocytes
Biopsie
Cellules / Culture des cellules
Liquides biologiques
Plasma
Urine
Salive
LCR
écouvillonnage
Purification
Chromatographie
Colonne de gel
Adsorption
éthanol
Automatisé
Billes magnétiques
GeneProof
400 µL échantillon
Mix
10 µL Contrôle interne
séquence d'ADN ayant même T° d'hybridation que le cible
20 µL Protéine Kinase
extraction ARN
10 µL Carrier
polyA
Tampon spécial
lyse des éch biologiq
Isothiocyanate
de guanidium
sel
adhésion des acides nucléiques aux billes
élution
Contrôle quantitative et qualitative
Dosage de l’ADN / l’ARN
spectrophotométrie en UV 260nm
fluorométrie
Vérification de la pureté
DO à 260 nm/DO à 280 nm
Si < 1.8
contamination protéique
Si > 2
contamination par l'éthanol
entre 1.8 et 2
Vérification de la qualité
Électrophorèse sur gel d’agarose 1.5%
bande unique non un smear
75 min