Ukuran inokula adalah 105 spora' ml. Labu dikocok pada 120 rpm selama 7 hari pada suhu 30 C. Supernatan kultur dan pelet dipisahkan dengan filtrasi. Supernatan dibuang dan 1 g pelet disuspensi kembali dalam 100 ml buffer sitrat 0,05M (pH 4,8) dan dihomogenkan dan disimpan dalam penangas es. Kondisi fermentasi optimal 120 jam, pH 4 2, suhu 40 10 C, konsentrasi substrat 1–5%, ukuran inokulum 10–13 105 CFU/ml