Please enable JavaScript.

Coggle requires JavaScript to display documents.

protein tái tổ hợp - Coggle Diagram

- - - - yêu cầu
        
        có trình tự khởi đầu sao chép
        
        có đặc điểm/vị trí để chèn đoạn
        
        có dấu chuẩn để sàng lọc, gen chỉ thị
        
        dễ dạng phân tách, tinh sạch
      - các loại
        
        plasmid: DNA insert <7kb
        
        Bacteriophage: DNA insert có thể đạt đến 15 kb
        
        Cosmid: 35-45 kb
        
        Plasmid Ti
        
        Nhiễm sắc thể nhân tạo của nấm men YAC (Yeast Artificial Chromosome): DNA insert có thể đạt đến 2000 kb
        
        Nhiễm sắc thể nhân tạo của động vật có vú MAC (Mammalian Artificial Chromosome): DNA insert có thể đạt đến > 2000 kb
  - - - 2 đoạn tương đồng vs tb chủ
      - có marker sàng lọc tb chủ được cài nhập
    - - có đầy đủ yếu tố biểu hiện điều hòa gen: promoter; terminator; trình tự đuôi và trình tự cắt tinh sạch; vị trí bám của ribosome; trình tự tiết
      - có gen biến nạp sàng lọc qua dấu chuẩn
      - có mặt promoter mạnh=> phiên mã liên tục
  - - - giá thành
      - dễ thao tác
    - - được nghiên cứu lỹ về mặt di truyền
      - thực hiện glycogyl hóa protein
      - sachromyces cerevisiae, pichia pastoris
    - - có hệ tương đồng giữa các hệ thống biến đổi sau dịch mã
    - - sx được protein tái tổ hợp với các biến đổi sau dịch mã
  - - - Gửi mẫu xác định trình tự DNA theo phương pháp Sanger
      - So sánh trình tự DNA với trình tự tham chiếu trên NCBI
      - So sánh trình tự amino acid suy diễn với trình tự tham chiếu trên NCBI
    - - phá vỡ tb/ thu dịch nuôi cấy
      - sử dụng pp sắc ký
      - kiểm tra độ sạch và hoạt tính của protein tái tổ hợp : SDS-PAGE
        
        hồi tính protein
        
        sử dụng pư đặc biệt
  - - - nồng độ chất cảm ứng
      - thời điểm thêm chất cảm ứng
      - thời gian biểu hiện
      - nhiệt độ nuôi cấy
      - Đánh giá= SDS-PAGE
- - - - insulin
  - - - hoạt tính ez hoặc điều hòa
    - - nhắm đích đặc hiệu
    - - làm vaccine
    - - để xét nghiệm chẩn đoán