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CITOMETRÍA DE FLUJO CMF +ÚTIL - Coggle Diagram
CITOMETRÍA DE FLUJO CMF +ÚTIL
SEPARADOR DE CÉLULAS (CELL-SORTER)
PERMITE: caracterizar inmunofenotipo, separar y aislar poblaciones de células
PASOS
Corriente de gotas se somete a vibración --> pequeñas gotas con una única célula
Gotas se separan según la carga
Identificación celular
Pulso voltaje --> carga +/-
Análisis celular
Separación en tubo independiente
Citómetro que permite aislar para poder procesar diferentes poblaciones, hay una corriente o pulso que separa las células
PARÁMETROS
DISPERSIÓN DE LA LUZ
Gránulos citoplasmáticos
Complejidad de la membrana
Núcleo
Tamaño celular
INTENSIDAD DE LA EMISIÓN FLUORESCENTE
Grado de emisión fluorescente proporcional a la cantidad de componentes marcados en la célula
La emisión es captada por el detector de fluorescencia correspondiente
Fluorocromo/ fluorocromo conjugado AcMo
La intensidad emitida es proporcional a la señal del detector
VENTAJAS
Fiable
Estudio simultaneo de gran cantidad de células
Rápida
Datos de gran valor estadistico
APLICACIONES
Proliferación celular
Apoptosis
Análisis del ciclo celular
Señalización intracelular
Expresión de citoquinas y citoxicidad
Análisis clínicos
Estudio del fenotipo
MARCADAS POR
Tinciones con fluorocromos
Anticuerpos monoclonales (AcMo) conjugados con compuestos fluorescentes
SISTEMAS DE
ÓPTICO: fuente de excitación(laser), lentes y prismas, espejos dicroicos, detectores
ELECTRÓNICO: convierte señales de luz en --> señales electrónicas (digitalización --> ordenador)
FLUIDOS: recoger las muestras, restringe su paso por la cámara de flujo (donde se hecha el líquido)
Técnica de análisis celular multiparamétrico que se basa en hacer pasar una suspensión de células alineadas de una en una por delante de un haz de luz laser --> identificar células de forma individualizada
ADQUISICIÓN DE MUESTRAS Y ANÁLISIS
Se definen en función de: objetivo, tipo de célula y análisis a realizar
ADQUISICIÓN TOTAL: todas las células presentes en una muestra
Proceso de recopilación de datos de muestras utilizando CMF
ADQUISICIÓN POR VENTANA : tipo concreto de cel (ej las cel que estan en fase G0)
Para aumentar resolución, velocidad de adquisición baja
Cuanto menos frecuente es la población, mayor número de células se adquieren