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Métodos de purificación de proteinas - Coggle Diagram
Métodos de purificación de proteinas
Preparación del Extracto
Para iniciar se realiza
Lisis para obtener lo que se produce
Primeros procesos
Extracción y estabilización
estabiliza
pH isoeléctrico
pH ácido
pH básico
Preparación y obtención de metabolitos
Se llevan a cabo 7 pasos
1. Extracción
(metabolito intra o extra celular)
2. Estabilización
(T° y la proteasa)
3. Separación
(Precipitación, filtración y CCF)
4. Verificación
(Electroforesis)
5. Conservar
(Liofilizar, sublimación)
6. Rendimiento
7. Métodos de análisis post purificación
Estabilización
donde
La Temperatura es esencial ya que puede alterar la estructura de la proteína cuaternaria
La Temperatura de congelación para conservar el material
La proteasa que puede cortar su función, por ello se agrega anti proteasas como inhibidores
Separación de componentes del extracto
Se realizan 3 pasos
Precipitar proteínas
con sulfato de NH4, 1er producto manejado a casi congelación
Filtración
Cromatografía en capa fina (CCF)
para purificar y correr la muestra por afinidad