Please enable JavaScript.
Coggle requires JavaScript to display documents.
Dag 1 - Coggle Diagram
Dag 1
Trizol
Fenol
Schadelijk
Labjas, handschoenen, etc.
Chloroform
Isopropanol
RNA neerslaan
Celmembranen doorbreken
Dag 2
2 cDNA synthese
Reagentia
5x iScript reactie mix
iScript reverse transcriptase
RNA (250 ng)
RNase-vrij water
concentratie geïsoleerde RNA bepalen
Nanodrop
UV-Vis-spectrofotometrie
A260/280
Eiwitvervuiling
Ideale waarde 2.0
Zuiverheid nucleïnezuren bepalen
A260/230
Ideale waarde 2.0 - 2.2
Verontreiniging
Elke dag bouwt voort op de vorige om de PCR uit te voeren en de genexpressie te meten
Dag 3
PCR
Componenten
SYBR green 2x
Forward primer
Reverse primer
Diluted cDNA
Expose
Control
RNase-vrij water
Mastermix
Primers
Op exonen
95 graden
Denaturatie
60 graden
Annealing en elongatie
Expressie van genen meten
P21
GADD45A
HPRT
Dag 4
Agarose gel electroforese
Loading dye
Glycerol/sucrose
Monster zwaar maken
Kleurstoffen
Visueel maken van sample
Amplicongroote
Gen expressie = 2 - ∆∆ Ct
HepG2 cellen
Blootgesteld
Doxorubicine
Benzo-a-pyreen
Peroxide
Ultraviolet licht
Niet-blootgesteld
Ethanol
Volledig verwijderen
Verontreiniging
RNA isolatie